沿河县乳糖
天然Brazzein的氨基酸序列缺少端蛋氨酸（甲硫氨酸）[图5-24 (2)]， 因此合成基因[图5-24 (3)]的第一个密码子前引人起始密码子Met。野生型葡 萄球菌核酸酶中含有4个蛋氨酸，经CNBr解离产生的肽链会影响Brazzein的分离 纯化，因此用快速定点突变将核酸酶基因（SNase)的4个Met的密码子用Ala的 密码子替换。SNase的4个蛋氨酸转化为己氨酸（正亮氨酸）对核酸酶活性没有影 响，SNase中蛋氨酸突变为丙氨酸会降低核酸酶的稳定性。经修饰后融合蛋白中只 有一个的蛋氨酸间隔SNase和SW K [图5-25 (2)],所得的融合蛋白表达水平 高并且核酸酶具有活性。在如-pGlul - Brazzein合成基因的5'和3'端分别加上 Ndel和BamHI位点，这样就可以克隆至任一 pET质粒。通过对天然核酸酶-卵类 黏蛋白融合基因表达质粒进行改造构建新的质粒。将Brazzein合成基因（SW基 因）插人pET-3a表达系统SNase基因C-端的Ndel和BamHI位点之间，得到质 粒PET-3a/SNase-SW [图5-25 (1)]0融合蛋A转录和翻译信号由T7表达载 体PET-3a产生，蛋白质在lac启动子的控制下生产。
用来提髙提取物产品风味的酶处理法，除了可通过酶重组法使甜菊苷转 变成味觉特性更好的甜菊双糖苷A外，通常还使用适当的转变剂将糖分子中 的葡萄糖单元转移至甜菊苷或其他甜菊苷类似物分子上。能提供葡萄糖基的 物质有芦_(1~>4)葡萄糖基、葡萄糖、冷-(1—3)葡萄糖基、环状糊 精、淀粉或部分水解物及同时有酵母存在的蔗糖、甘貉糖等。1980年有篇 美国专利描述了甜菊苷的酶处理方法，认为a-糖基甜菊苷的丨丨感特性优于 甜菊苷。
很多世纪以前，非洲西部就种植一种能结鲜红色、金字塔形状果实的植物。 这种果实紧挨皮层以下的组织具有强烈的甜味，它的使用甚至比甘蔗引入非洲西 部还要早。然而，这种果实直到19世纪才在较大范围内被人们所认识。很多植 物学家开始周游这块“黑大陆”，对该植物进行分类与鉴定。Daniell于1839年 首次遇到这种红果子，进行了很多的研究。他在1855年的PhamrnceuUcal Journal (《药学学报》）上报道了他的研究结果，证实这种果实内部肉质有很强的甜味。 后来，BermeU经仔细分析认为它属于木冬叶届(Pkrjnium'}植物，就将之命名 为P. daniellii借以纪念其发现者。BemuiU还用传统的拉丁文字对这种植物做f 详细介绍。但令人遗憾的是，Bernie丨丨鉴定错了，后人重新鉴定确认它属于竹芋 科（Maranlaceae)植物 77Mmmo/ocomw,故重新命名为：T. danieliii (TD)。
受试人或动物的种类不同，由环己胺引起的睾丸萎缩中毐现象也是有差别 的。它对大鼠的中毒现象最明显，给较幼小的大鼠以200mg/kg水平喂养90(1或 更长时间就出现了轻微的中毐现象。以150mg/kg和175rng/kg水平进行试验结 果一样。但以最大剂萤300mg/kg水平喂养小鼠并没发现睾丸萎缩现象。对大鼠 来说，最主要的代谢途经是通过脂肪羟基化作用，保持了氨基，但对小鼠来说， 代谢是以脱氨基作用结束的。在小鼠尿中泌尿系统总代谢产物中，环己醉及其共 轭化合物占相当一部分比例，其余的是环己基-1, 2-二醇，而人体的主要代谢 产物正是环己基-1, 2-二醇。比较环己胺对哨齿动物和人体的有关代谢试验结 果，发现小鼠的毒理试验结果比大鼠更接近于人类。
将含嗦吗甜！、A、B基因的质粒（图5 -3)转移至酵母菌株AH22和 BB25-ld,对照质粒中除没有PGK启动子和嗦吗甜基因外，其余都相同。细胞 在选择性培养基上培养后，进行分离提纯。
续表
6)自洛乳酿小球菌(Micrococcus caseolyticus)的阿斯巴甜水解购能在与 水混溶的冇机溶剂中将不带保护基的L-天冬氨酸与苯丙氨酸甲酯缩合生产阿斯 巴甜。
Polypodosides B等三种，图4 -40所示为它们的化学结构。
