源城区乳糖
使用产物沉淀法，当L - PheOMe过贵时在水溶液反应也能有很髙的得率， 其中Z - L - Asp - L - PheOMe与L - PheOMe形成不溶性沉淀。各取底物 2?10mL水中混合，并加人10mg嗜热菌蛋ft酶，起始pH6~8，在 概保持3 ~5h可得到Z-L-Asp-L-PheOMe ? L - PheOMe白色沉淀，该沉淀 得率大于95%。研究还发现，以外消旋化合物为反应底物时，只有L-PheOMe 参与缩合反应得到产物为Z-L-Asp-L-PheOMe，但D - PheOMe也能与Z-L- Asp-L-PheOMe形成沉淀。根据这些研究结果，Tosoh公司开发了生产工艺流程 (图2-20)，并在1984年完成了中试。
甘草甜素既不会促进S.mu/ci/w的生长，也不会诱导牙斑的形成，相反，它 还能明显地抑制细菌在含有蔗糖介质的牙齿表面上的粘附和聚积。但口服甘草甜 素并不影响口腔内复杂的微生物平衡体系。由S.mu/mw在牙齿表面的依附对龋 齿的形成具有重大作用，因此甘草甜素能抑制由蔗糖引起的致龋齿细菌性牙斑的 形成，这一事实很令人感兴趣。甘草甜素的这种抗依附效果可能是通过对酶GTF 活性的抑制而实现的。通过观察甘草甜素对GTF酶制剂（从致龋齿细菌 中分离出）产生黏多糖的直接影响，证实了上述观点。
对不同内阻下场强对转化率和活细胞的影响作了研究（图5 -18)。细胞悬 浮液与1叫经Bgi fl酶切的pCLRE2混合后在电容25jjlF下进行电脉冲转化，电 脉冲后，细胞在30T添加了 lmol/L山梨糖醇的YPD培养基上培养6h。在场强 为3.75kV/cun和内阻80W1时得到最高的转化率，约为1400个转化体/jxg线性 pCLRE2。在3. 75和5. 0kV/cm和内阻6(X)、800或100011时转化率较高[图 5-18 (1)]0这些条件下细胞存活率为10%?40%，实际脉冲时间为11 ~ 17ms [图5-18 (2)]。当内阻200或400ft时，转化率低。
1%9年全面禁用后，除f Abbott实验室外，美国的其他所有厂家均停业生 产。之后，日本也相继禁用，只剩下其他一些国家，主要是巴西、南非和印度尼 西亚还有些市场。然而，欧洲仍允许使用，因此当时德国和西班牙反而建厂 生产。
通过转基因莴苣和番茄均可生产莫奈林，但两者植物所使用的启动子并不相 同。在转基因番茄表达使用的是E8启动子，这种后动子是可定向使莫奈林基因 在番茄中表达的水果专用启动子。而在转基因莴苣中表达则使用CaMV启动子， 这种启动子在许多植物器官中都具有活性。把含有莫奈林带E8启动子或CaMV 启动子的基㈥引入中即可。蛋白质从西红柿果皮或莴苣叶中提取。 对提取的蛋白质做western印迹分析和EL1SA,结果表明，在带有E8启动子和莫 奈林基因的转基因西红柿果实和带有CaMV启动子和莫奈林基W的转基因莴苣叶 中均可检测到重组莫奈林。用乙烯处理转基因两红柿，可使西红柿果皮中莫奈林 的产谊提高至23.9?^丨鲜重，诚著高于未经乙烯处理的转基因番茄。
将50g橙皮素加到250mL10%的氢氧化钾溶液中，室温放置30min后用10%的 钯-碳催化剂（4g)催化氢化1.5h。原料可用粗制的或直接市购的橙皮素，但以 重结晶的为好。将混合物过滤，用盐酸调节至PH7.0后，将溶液用水稀释至 600mL,加人5mL36%的浓盐酸溶液，然后快速加热至沸腾，回流2.5-2*75h。混 合物中HDG (DI)和橙皮素二氢查耳酮的比例大约为1:1。油状的反应混合物冷 却后可用4xl00mL的醚抽提，蒸发后得橙皮素二氢查耳酮16g (熔点1981)。 提取余液（带有一定的油牲）罝于冰箱中可得到纯净的橙皮素二氢查耳 酮-D-葡萄糖苷（II) 10. 3g，再用31%的乙酸乙酯抽提水溶性滤液， 可得1.5gHDG。HDG的甲醇结晶体呈无色针状，熔点119 - 121T：。用a - L -鼠 李糖苷酶水解除去鼠李糖后得率更髙，但不太方便。
碳水化合物的甜分子识别单糖结构的微小变化如个別手性碳原子的变化，均会影响化合物的甜味。 a-D-半乳糖不如D-葡萄糖甜，它的C - 4立体异构体以及L-山梨糖、 D-果糖的C-5立体异构体的甜度均只有D-葡萄糖的1/5。但D-果糖比 D-葡萄糖和蔗糖都甜，很大程度上是由于/3-D-吡喃果糖的存在（表1-1)。 卢-D-吡喃果糖中可能存在一种三角形生甜团系统，即在其椅式构象中， AH = 1 -OH, 8=2-0和乂=6-!1。这些基团与甜受体发生作用时呈顺时针方 向排列[图丨-11 (a)],而甜受体基团（NH/C0/R)也呈顺时针方向排列，以 便于和呈顺时针安排的生甜团发生键联（图1-丨2)。有一些事实可以证实上述 观点，就是甲基-办-D-吡喃果糖苷的甜度比办-D-吡喃果糖弱得多；在 L-果糖中羟基的作用在于使其分子结构颠倒后仍具相同的构型（AH=2-OH， B = 1 -0fflX=6-H)；芦一D—批喃葡菊糖H：a_D-P比喃効?萄糖甜得多；/3-?1 糖的甜度是ot-乳糖甜度的两倍。这些事实，再加上甲基吡喃葡萄糖苷 和《，a-海藻糖只有萠糖甜度的1/8这一事实，表明异头碳原子的羟基参与了化合物产生甜味的过程。在jS-D-吡喃葡萄糖中可能存在X=5-H，AH=2-0H和 B = 1-0的三角形生甜团，并在以图1-11 (b)方式给出的平面上呈顺时针排 列。这与Birch等人关于AH是C -3或C -4上羟基的观点不一致。
甲苯法生产糖精钠的工艺流程见图 6-11。
用AmiconYM-丨0?<￡缩.通氮气，在25*C保持3h
