成县三氯蔗糖
相反，当以2-0H/3-0为AHS/BS对时，甜味蛋白受体和三氣蔗糖的两个分 子间氢键AHr (NH3J……Bs (3-0)和B, (C0NH2)……AHS (2-0H)的距 离和键角分别被迫成为（0.29±0.01) nm, (180±16)。和（0.28±0.01) nm, (160±20)°,如图3-54所示。此时只有4-C1 (X5S) 一个疏水部位和受体 < 氨 基酸残基侧链宥着良好接触，而其他两个疏水部位r -C丨和f -C1却处于远离 与受体相互作用的位置。而且，4’-0H也远离受体X:氨基酸残基的侧链，使得 4f - OH与受体X丨氨基酸残基的酸性侧链之间不可能形成重要的额外氢键。因 此，选择2 - 0H/3 - 0作为三氣蔗糖分子的AHS/BS对并不合适。
(二）提高反应平衡得率的途径山式（2-5)知反应平衡得率会受底物浓度5。影响。S。增大，平衡得率增 大。在 L/ [H20] =0.5 (mol/L)-1, S0 = lmol/L A,平衡得率提髙至 11.8%，与5。=0.丨》1101/1.时的平衡得率4.55%相比增加不明显。由于通常在羧 基或氨基末端有保护基团的氨基酸溶解度很低，即底物氨基酸浓度不可能增加很 多，因此通过该途径很难大幅度提高平衡得率。这里介绍几种使平衡向肽生成方 向移动的方法。
对不同内阻下场强对转化率和活细胞的影响作了研究（图5 -18)。细胞悬 浮液与1叫经Bgi fl酶切的pCLRE2混合后在电容25jjlF下进行电脉冲转化，电 脉冲后，细胞在30T添加了 lmol/L山梨糖醇的YPD培养基上培养6h。在场强 为3.75kV/cun和内阻80W1时得到最高的转化率，约为1400个转化体/jxg线性 pCLRE2。在3. 75和5. 0kV/cm和内阻6(X)、800或100011时转化率较高[图 5-18 (1)]0这些条件下细胞存活率为10%?40%，实际脉冲时间为11 ~ 17ms [图5-18 (2)]。当内阻200或400ft时，转化率低。
(四）辅助因素对产率的影响研究表明，在低熔点混合物中加入适宙:的有机溶剂能降低混合物的熔点，从 而提商酶反应的效率。图2-66所示为加入不同溶剂对反应产率的影响。其中， 加入二甲基亚砜（DMSO)和2-甲氧基乙酸乙酯（MEA>能使产率达到60%， 而辛醉和正己烷的加人使产率低于50%。这可能是因为疏水性的有机溶剂能够 改进和保持低熔点混合物的特性，从而能够促进酶反应的产率。图2 -66 不同辅助有机溶剂对反应产率的影响 注：有机溶剂都按丨5% (w/w)的比例加人，苄氧羰基-L-天冬氨酸二乙《和D-内氨酰胺分 别加人0.5mmOl, C6HnNHSOjH ? N (CH,〉3 C6HnNHS03H ? N (CHj), +NaOH ~?QH,,NHS03Na + (CH3),N + H20
研究表明，与蔗糖结合后处于活化状态的受体蛋白，其AH-B、B-XH、 XH-G丨、G,-G2、G2-G3、G3-G4 和G4-AH距离都约为0?65mtl,这七个识 别部位通常是天然糖甜味分子的基本识别部位，空间排列为非对称的七边形。
