坊子区木糖醇

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要在酵母中表达嗦吗甜,首先要合成相应的基因。为使基因能在酵母中高效 表达,采用酵母优选密码子合成嗦吗甜I基因,为便于操纵DNA序列,在嗦吗 甜基因设计时在序列中包含多个限制性酶切点。嗦吗甜I基因长度为630bP,它 的DNA序列的5'端和1端分别为Bel I位点和Xho I位点。嗦吗甜I合成基因经 直接定点突变或DNA片段替换合成嗦吗甜A、B基因。将嗦吗甜I基因113位 的天冬酰胺的密码子替换为天冬氨酸的密码子即得嗦吗甜A基因序列,随后将 嗦吗甜A基因46位的天冬酰胺的密码子替换为赖氨酸的密码子即得到嗦吗甜B 基因。
4.非均匀酶反应体系的产物及反应机制
由于微生物表达系统在产生功能蛋白方面的不理想,科学家们逐渐将注意力 集中在转基因植物的研究上。在马铃蕃中的表达成功启示可以将甜味蛋由基因转 进其他畜用或人用经济作物中表达,从而增加其食用价值。同时由于甜味蛋白的 表达fi仍然偏低,培养出高效表达的转基因植株仍是一大难题。
通过考察牙齿珐琅质被溶解的牙斑pH下降的悄况,对几种不同糖果的致龋 齿特性进行了深入的研究。这些研究表明,含有甘草的糖果比其他多数糖果所引 起的珐琅质的溶解量要少,牙斑的pH下降幅度也小。
最后将L-天冬氨酸以N-苄氣苯基天冬氨酸或恶唑烷酮的形式与前两步反 应得到的D-丙氨酰胺缩合。苄氧基苯天冬氨酸溶解在多聚甲醛、对甲苯磺 酸和甲苯的混合液中,在lOOt回流lh,然后加人D-丙氨酰胺和三乙基胺在 60T下反应6h,反应结束后,反应液分别用lmol/L的盐酸和水洗,有机相用硫 酸镁干燥,过滤干燥得到阿力甜,产率为85%。
以2# (kg-d)浓度水平喂养怀孕小鼠6~15d,发现嗦吗甜没有致畸性。活 体外微生物基因诱变试验表明它没荷诱变活性。因为嗦吗甜是可溶性蛋白,有人W 此推测它在肠道内可能具有免疫活性,但经口试验没检测到它的任何免疫活性。
比如糖精、阿斯巴甜之类高效甜味剂的开始作用时间(onset times〉与蔗糖 不同,停止刺激后的甜味持久性也与之不同,其甜味质量也有所区别。这样,就 给人们提出这样一个问题:不同的甜味剂是否具有不同的甜受体?有人怀疑受体 的均匀性,认为没有专一性受体,而只有一般化的受体,即可能存在多种甜 受体有些精神物理学资料也支持存在几种不同甜受体这种观点。但味觉改性研 究,诸如用森林匙葜藤酸(gynmemic acid)去除掉所有类型的甜味后并不改变 其苦味特性的研究,表明公共受体存在的可能性更大些。Grosby等人和Price等 人认为同一受体上有不同的结合部位,并列举了数个理由来支持:①用蔗糖溶液(0.32rnol/L)洗舌后发现蔗糖甜度降低80%,用糖精溶液 (0.01mol/L)洗舌后发现其甜味减少55%,这表明同种甜味剂进入受体上同一 部位有饱和效应②蔗糖与甘氨酸混合后甜度比单一的强3 ~5倍,这说明不同类型的甜味削 进入不同部位有协同增效作用。③果糖能抑制甘氨酸的甜味,蔗糖或糖精能减少多种甜味剂的甜度,这又 表明多种甜味剂进入甜受体同一部位发生了竞争性抑制。④若有多种受体,則不同的甜味剂进入不同的受体,将没有竞争,其甜味 应有加和性而无协同增效性。但迄今尚未有这方面的验证,而电生理实验证明同 一受体可有不同的结合部位。⑤甘茶甜素和二氢查尔氓两类甜味剂都具有以下结构,但其空间专一性要 求各不相同。
1%5年,美国Searle有限公司的Schlatter偶然发现了一种带甜味的二肽化合 物——阿斯巴甜。从此开始,以阿斯巴甜为原型,人们研究了 1000多种与之相 关的二肽及二肽同型物,以期获得一种更为理想的高效甜味剂。本节对这个十分 活跃的研究领域的进展与动态做一详细的论述。

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