麦积区阿斯巴甜
第五节其他高效糖苷
在本研究中，VUsmeiei■试剂由PC15和冷冻DMF ( PC15质量/kg: DMF体积/L = 1:1.5)反应制得，反应中温度不超过50$。以Vilsmeier进行选择性氣化反应 时，温度最好为1丨5~125弋，因为温度过低，反应速度过慢；温度过髙，易造
(2)PK. 477bp； P^, 761 bp； P-. 880bp； 750bp。
食品添加剂可接受的每日摄入量是在动物试验的无毒副作用水平基础上外加 100倍的安全系数，由政府管理机构和专家委员会来制定。可接受的每H摄入摄 不是一个安全阈值，是指在人的一生中每天可以安全食用该添加剂的限萤，但是 偶尔超过可接受的每日摄人最也是可以的。
表4 -20 环状芽孢杆蔺的fi -半乳糖苷酶催化甜叶悬钩子苷
经逐步稀释品尝试验测定植物嗦吗甜的甜味阈值为（2. 3 ±0.9) jig/mL,分 泌嗦吗甜及折登型嗦吗甜的甜味阈值均与植物嗦吗甜的相近。
为检测酵母嗦吗甜是否具有甜味构型开发了 WA检测方法（radioirmmmoassay, 放射免疫分析法）。小鼠接种纯嗦吗甜A后会产生单特异性抗体（monospecific antibodies),它的免疫血淸稀释约50000倍后能选择性地与天然（甜味）构型的嗦 吗甜发生反应，时非天然构型、变性嗦吗甜或嗦吗甜的肽段与抗体的结合能力远不 及天然嗦吗甜。RIA可测定的嗦鸣甜最低浓度为Ing/mL，敏感度约是感官品尝试 验的丨000倍，并且适用范围也更广，对粗提物等都可以测定。将溶于SDS的酵母 嗦吗甜经SDS凝胶电泳分离后转移至硝化纤维滤纸富集，用稀释2000倍的老鼠嗦 吗甜A血清抗体进行检测，发现富集后的变性嗦吗甜及其溶解在SDS中的部分都 能被该血清抗体识别，该被识別组分在电泳中与植物嗦吗甜一起发生迁移。但对酵 母提取物进行RIA分析，没有发现能发生交叉反应的可溶性蛋A质，这可能是由 于酵母细胞内的还原态环境使嗦呵甜的二硫键还原而使蛋A质发生变性沉淀，因而 细胞中就+存在天然水溶性的嗦吗甜。并且由于蛋白质N端没有连接分泌信号序 列，细胞不分泌蛋白质。
(1 )采用 土 chrysogenum 的 B2 培动子（2)采用 P. chrysogenum 的 pcbC 启动子 (3) /l.rjwamori 的 gdhA 肩动子（4) /!? n/rfuimM 的 gpdA 启动子
第二步，制备6-甲基-3, 4-二氢-1, 2，3-1嗯噻嗪-4-酮-2, 2-二 氣化物。取一定量的三氧化硫溶液（20%)，快速搅拌（800r/min)下，约 15min滴入上述溶液中，继续环化一定时间。约20min内，滴加三氧化硫4倍物 质量的蒸馏水，调整水解温度，继续髙速搅拌一定时间，停止反应。反应方程 式为：
停止。滤去催化剂，将滤液罝于冰浴中，用浓盐酸酸化，然后置于冰箱中使其结 晶完成。收集柚莳二氢查耳酮晶体，水冼后使其在水中进行重结晶，真空干燥后 得104g (94%)的晶体（熔点not)。若再在丙酮中进行敢结晶，则可得到另 一种晶形的晶体（熔点212弋，质世94g)。
