久治县纽甜

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多点结合甜味理论1991年,Tinti & Nofre提出了著名的多点结合甜味理论(the Multipoint Attachment Theor) ) 0该理论认为,人体甜味蛋白受体最少包含八个基本的识別 部位,这些识别部位与甜味分子相应的结合部位发生相互作用,从而产生甜味 刺激。
奇异果素的提纯工艺
对嗦吗甜基因进行体外突变,或插人合成低聚核苷酸罝换DNA序列或在体 外诱变,得到大量突变基因。这些突变基因克隆至酵母,使其分泌嗦吗甜。大多 数这些带突变基因的质粒能使酵母分泌变异嗦吗甜,但也有些质粒中没有插人使 嗦吗甜分泌的DNA序列,也没有能使嗦吗甜发生折番复性的突变。
TGS -6 -a与乙酸酐吡啶溶液充分反应得到TGSPA,此全酯化反应不涉及选 择性保护的问题,因此反应条件相对于蔗糖C-6位的单酯化来说要宽松得多而容 易进行。然后,通过乙酸乙酯或甲苯等有机溶剂将TGSPA从含水的体系中提取出 来,再经浓缩、结晶,最后脱除5个乙酰基,即可得到较纯的三氣蔗糖终产物。
由于奇异果素的糖蛋白在果实中的含萤很低,它本身对温度和pH的变化又 很敏感,这就给分离与提纯带来很大的困难。早期报道的提取工艺由于残留有蛋 白酶活性,所以得率很低。其他方法则要求使用复杂的溶剂系统以及精细的纯化 步骤,即使这样,每吨浆果最多只可提纯出200mg左右的奇异果素。较大规模 提取时,lkg浆果通常只能获得50mg的产品。奇异果素本身对热及pH很敏感, 在低于PH3或高于PH12的室温环境下会失去活性。然而l(XVg的奇异果素就足 够提供持续延绵的增甜效果。实际应用时,1kg的浆果可提供数倍重虽蔗糖的 甜味。
6'-CH2 (Xs8),后者与两个疏水部位构成生甜团,分别为r-CH2 (Xs4)和 6-CH2 (Xs5)。这种多敢疏水作用导致蔗糖分子与受体不同侧链形成色散键, 从而使甜味增强。生甜团三合体(AHs/Bs/Xs4、AHs/Bs/Xs5、AHs/Ba/Xs8)的 分子构象,与预期的顺时针方向一致。使用髙度亲油性氣原子,取代蔗糖分子葡 糖基和果糖基上特殊位置的羟基,这些特殊位置包括C-4、c-r、C-V和 C-6\而不取代6-OH基团,可以使蔗糖甜味明显增强。表3-18所示为三氣 蔗糖及其衍生物与受体蛋白的作用部位。
1.奇异果素的二聚体模型
1982年,Sweatman和Renwidc报道了糖精在两代曰鼠机体组织中的分布情 况。用[3h]糖精喂养刚受孕的白鼠,发现糖精在胚胎组织(包括膀胱)中浓 度的增加比较缓慢,经48h后胚胎排出由母体传来的糖精,这表明母体如果长期 摄取糖精,则胚胎有缓慢积累的可能。尽管如此,母体摄人含5%糖精的饲料 后,胚体的肝和肾中的糖精浓度恒定,且比相应的母体组织中的浓度要低,但胎 儿膀胱中糖精的浓度与母体的相等或甚至更多。
要使表达系统的表达水平较髙,则必须选择一强启动子。以Escherkhia coli lacZ为报告基因,发现C. ulULs的GAP启动子比C. utilis的PGK启动子的 效率高几倍。W此用的部分GAP基因(TDH3 )作为探针从

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