天长市甘草甜素
Akiko Shimizu - Ibuka等综合分子动力学和对接模拟的结果，提出了 Neoculin 甜味产生和味迫修饰作用的机制的猜想，如图5 -29所示。Neoculin的结构是处 于打开和闭合的动态平衡的。当降低pH时候，平衡会转向打开的状态，此时， 只有处于打开构象的那部分才可以与hTlR2 -T1R3受体结合。结合于受体的 Neoculin则会改变受体的构象平衡，使之变为活性形式。因此，Neoculin在酸性 条件下可以产生强烈的甜味，而中性条件下，甜味则十分弱。但是，至于pH的 变化是如何影响受体结构，这点研究人员仍未搞清楚，并且在实验过程也没有考 虑这方面的影响。
基末端的311个氨基?酸序列（pCKKhb只含141个氨基酸）的cDNA序列 (SS-B2),和两个串联作为类KEX2蛋白酶切割位点的LyS-Arg序列，以及用 每菌优选密码子合成的嗦吗甜II基因（tha)和S. cerevisiue的CYC1转录终止子。
研究发现，PFR的生产效率一般要比CSTR的髙^当两者的合成速率相同 时，CSTR内部的反应条件与PFR出口处的反应条件相同，因此此时CSTR的 Z-Asp浓度较低，固定化酶内部pH比PFR入口处稍高。试验证实在CSTR中反 应可连续进行。图2-26显示在51 = 0.95外时，反应得率为90%可持续300多 小时。用上述条件，在lm3CSTR中，用400kg湿固定化酶，可生产10〖阿斯巴 甜。尽管固定化酶用于实际工业生产阿斯巴甜还存在许多问题，但这结果说明酶 法生产很有前景。如果能在PFR中实现连续化反应，则效率将会更髙。在另一 研究中，通过降低温度至25T,并同时降低底物浓度的方法，在PFR中实现了 连续化反应，在外=1. 85/h下固定化酶柱的稳定可保持500h。
用球形纤维素弱阴离子交换剂同定化GT-1对甜菊苷进行转化。研究发现， 固定化酶催化S苷的转化效率与游离酶相差不明显，重笈利用8次后活力下降较 少，说明固定化效果较好。该固定化系统的最优反应条件为55T，淀粉与甜菊 苷比例为1:1,振荡速率较大（200r/min)时可改善物质扩散，从而可增大
人们就甘草甜素的儿种衍生物对能促使前列腺素合成的环氧酶（cyclo - oxygenase) 活性的影响也做了研究，结果表明甘草甜素对它没有明显的抑制作用。 但也有报道说甘草亭酸对环氧酶活性具有一定的抑制作用，大约是26%,而甘 草甜素的一种衍生物 olean - 11, 13 (18) -二烯-3/3，30 - 二醉-3/3， 30一二-0-邻苯二中酸的二钠盐，对环氧酶的抑制程度达71%。人们还对甘草 甜素和甘草亭酸是否会影响5 -脂肪氧合酶活性的可能性做了研究。5 -脂肪氧 合酶是参与合成与气喘病、过敏症和发炎症有关的几种白细胞三烯（leurotri- enes)的第一种酶。结果表明，甘草甜素对5 -脂肪氣合酶只有较小的抑制作用 (14%)，而甘草亭酸的抑制作用比较明显，达43%。然而，olean-11, 13 (18) -二烯-3/3, 30-二醇-3)8，30-二-0-邻苯二甲酸的二钠盐能完全抑 制5-脂肪氧合酶的活性。这似乎表明，甘草甜素的邻苯-二甲酸衍生物对抑制 炎症的发生有着宽要的作用。
天然甜味化合物二氢五羟黄醐-3-乙酸酯的化学结构如图4-41所示。它 存在于巴拉圭菊科（Asteraceae )植物 TessanVi dodoneifolia ( Hook. & Am.) Cabrera的嫩根中，甜度是蔗糖的80倍。以此为母体化合物合成而得的二氢五羟 黄酮-3-乙酸酯-4'-甲基醚，甜度是蔗糖的400倍，没有苦后味，起始甜味 刺激略慢f些。这两种五羟黄酮衍生物均没有诱变性，喂养大鼠未发现急性中毒 现象。高耸空中的部分，在巴拉圭一直作为民间通经药使用，俗 称为“甜草”。
Sun等尝试了在转基因马铃磐中生产重组马槟榔。研究人员把全长马槟榔基 因克隆于带马铃薯块茎特异性patatin启动子和来&胭脂碱合成酶基因的终止序 列（NOS. sub. ter)或带CaMV 35S启动子和NOS. sub. tei■的栽体，并把基因和栽 体转染至马铃薯。他们用Southern印迹法分析了转基因植物并通过Northern印迹 法证实了马槟榔n被成功转录。
(-)柚苷二氢查耳酮（I)的生产技术
