合水县果葡糖浆
四、甜二肽分子结构的可变性
为检测酵母嗦吗甜是否具有甜味构型开发了 WA检测方法（radioirmmmoassay, 放射免疫分析法）。小鼠接种纯嗦吗甜A后会产生单特异性抗体（monospecific antibodies),它的免疫血淸稀释约50000倍后能选择性地与天然（甜味）构型的嗦 吗甜发生反应，时非天然构型、变性嗦吗甜或嗦吗甜的肽段与抗体的结合能力远不 及天然嗦吗甜。RIA可测定的嗦鸣甜最低浓度为Ing/mL，敏感度约是感官品尝试 验的丨000倍，并且适用范围也更广，对粗提物等都可以测定。将溶于SDS的酵母 嗦吗甜经SDS凝胶电泳分离后转移至硝化纤维滤纸富集，用稀释2000倍的老鼠嗦 吗甜A血清抗体进行检测，发现富集后的变性嗦吗甜及其溶解在SDS中的部分都 能被该血清抗体识别，该被识別组分在电泳中与植物嗦吗甜一起发生迁移。但对酵 母提取物进行RIA分析，没有发现能发生交叉反应的可溶性蛋A质，这可能是由 于酵母细胞内的还原态环境使嗦呵甜的二硫键还原而使蛋A质发生变性沉淀，因而 细胞中就+存在天然水溶性的嗦吗甜。并且由于蛋白质N端没有连接分泌信号序 列，细胞不分泌蛋白质。
都具有甜味或苦味。与之形成对比的是，甲基-a-D-吡喃葡萄糖苷的二脱氧衍 生物和海藻糖的四脱氧衍生物总是苦的而没有甜味，这就和它们的单脱氧衍生物在 味觉特性上不一致。因此也可以推知它们对受体的作用方式不一样（图丨-10)。
然而，鉴于两代白鼠试验发现了明显的膀胱癌变，似乎没有一个国家认为可 以无限里地使用，丹麦、荷兰等国家仍严格限制它的使用，世界食品添加剂联合 专家委员会也将原先同意的糖精AW值0?5mg/kg减少到0. 0-2. 5mg/kg,并取 消了有条件的0~15mg/kg。
如图丨-31 (1)所示，自由态I和自由态n之间的平衡可以通过结合小分 子甜味剂（结合小分子甜味剂使自由态I转换成与自由态n结构相同的复合态) 而改变，使Q由态I向有利于形成活性态的方向转化。但是，如果可以通过另外 的方式来稳定自由态n，那么也同样可以改变形态I和形态n之间的平衡。图
2.三芳基膦与四氣化碳
该反应中，糖苷酶催化转糖基反应的得率，主要由糖葙受体、供体、酶浓 度和反应时间决定。表4-U和图4-19分别表示细杆菌H-1的分-FFase催 化甜菊双糖A苷转糖苷作用时，RA浓度和反应时间对其转化结果的影响。受 体甜菊双糖A苷浓度较低时，RA-F转化得率较商；甜菊双糖A苷浓度较大 时，RA-F产量下降。RA-F最大产量在反应开始不久得到，延长反应时间, 由于RA-F发生酶水解使得率下降。在RA0.025mOl/L，反应lh达到最大转 化率82%;当RA浓度0.5mol/L,反应21h,转化率为19%。
Winnig等对识别lacUsole的分子基础进行了更为深入的完善。通过对特定受 体突变体的功能分析，他们发现小鼠WR3的第五个TM呎域的突变V738A足以 使小鼠甜味受体获得lactisole敏感件，尽管这一受体突变体的敏感性要比人体甜 味受体的低。另外，通过小鼠T1R3的突变K735F，可得到一个与人体受体具有 相同丨actisole敏感性的小鼠甜味受体。所有以前的资料均表明，甜味受体的 T1R3原体的TM K域中有真正的第四个部位。图1 -34描述了受体T1R2-T1R3 上的四个结合部位。
(四）质粒表达
表4 -27 不同来源的《 -半乳糖苷醵催化甜叶悬钩子苷的转糖苷反应产物
