汝州市爱德万甜
在脉冲前，细胞经二硫苏糖醇（di丨hiothrehol，DTT)处理或在样品中加人载 体DNA都+能提高转化率。用标准醋酸锂程序（standard lithium acetate procedure) 将线性PCLRE2转化至CandUu utULs得到的转化率非常低，1网DNA的转 化体不到10个。
mm.m.
CH2—C CH=C
4.非均匀酶反应体系的产物及反应机制
C-6位羟基的单基团保护是本制备法的核心步骤，要求所形成的中间产物 对氣化试剂稳定，而又易于脱除。其中，最适用的方法是酯类保护法，因为它兼 具引入方便、在所需反应条件下稳定以及易于除去等优点。通常选择羧酸的活泼 衍生物作为酯化试剂，其中最常用的是酰基酐或酰基卤。对蔗糖来说，形成乙酸 酯或其他羧酸酯娃最有效的保护醉羟基方法，这可以使它在随后的酸性条件中不 受影响。
TGS -6 -a与乙酸酐吡啶溶液充分反应得到TGSPA，此全酯化反应不涉及选 择性保护的问题，因此反应条件相对于蔗糖C-6位的单酯化来说要宽松得多而容 易进行。然后，通过乙酸乙酯或甲苯等有机溶剂将TGSPA从含水的体系中提取出 来，再经浓缩、结晶，最后脱除5个乙酰基，即可得到较纯的三氣蔗糖终产物。
子[图5 -7 (3)]和的gpdA启动子的转化菌得到的结果最好 [图5-7 (4)]，它们大部分转化体的嗦吗甜得率大于2mg/L,部分达到 9 ~ 11 mg/L；而采用P. chrysogenum的pcbC启动子（参与靑范素的合成）和 A. chrysogenun的B2酯酶启动子的尚株表达效韦都不高。
转糖苷反应的产物结构
钠溶液，合并到有机相中。无水硫酸钠十燥，过滤，蒸馏得6-甲基-3，4-二
第六章L.A；?；.含成钳.味刑
