六枝特区山梨糖醇

六枝特区山梨糖醇
阿斯巴甜的酶法合成技术由于化学合成法专一性差，得率较低，故人们又致力于酶合成法的研究，以期提髙得率并降低生产成本。酶合成法是使用合适的蛋由酶，将L-天冬氨酸 (氨基闭已保护或未保护）与L-苯丙氨酸甲酯缩合在一起。除此之外的操作，与化学合成法一样。酶法合成的优点和缺点比较明显。酶法合成的优点：①转化率通常达95%以上，比化学法（一般仅70%)高很多；②且酶法只生成《-型产物，没有冷-异构体生成；③可采用外消旋化合物为底物，而在化学合成法中只能采用L型底物。
值酸法迁移会引起降解和副反应，如进一步生成3, 4，6，3\ f -蔗糖五乙酸酯u有人发现在碱性条件下也可同样进行这个迁移过程，就报道的得率来看均可达到85%以上，可选择的有叔丁基胺、三乙胺、四氢化吡咯、/V，/V-二丙基胺和2-异丙基胺等。反应温度30?60t：，反应时间取决于温度和所用胺试剂，在2.5 ~ 10. Oh间变动。惰性溶剂要求能溶解4-PAS,并可部分溶解6-PAS 并能较早将之结晶析出，使反应进行完全，例如甲苯、甲基戊酮和乙酸乙酯。其反应机制可能娃胺夺去6-OH上的H，然后4、6位发生内酯反应。
[130](表2-59)具有甜味。后来，又相继合成出一系列的酰基-L-天冬氨酰-a-酰苯胺和酰胺。但这类化合物中，只有/V-三氟乙酰基天冬酰苯丙氨酸甲酯[131]的甜度接近天冬酰苯丙氨酸甲酯本身。不久又发现，某些情况下的三氟乙酰化会消除甜味，如天冬氨酰苯异丙胺衍生物[132]就属于这种情况，它的甜度为零。三氟乙酰化谷氨酰基衍生物[134]也没有甜味，丙二酰基衍生物经三氟乙酰化后[133]甜味也丧失了。Kawai等人从分子构象上对上述这些差异作了解释。在化合物[131]这种对a-氨基团的成功改进延续了 10年
(-)两相体系中Z-Asp-PheOMe的合成反应动力学要定量分析两相反应，首先需弄淸下列关系：①固定化酶催化反应在水相中进行，因此需了解反应在饱和有机溶剂缓冲液中的动力学和平衡关系；②底物和产物在水相和有机溶剂中的分配比；③分配比引起的水相pH变化；④水相、有机相之间物质传递产生的影响；⑤酶在界面吸附引起的变化。
乙烯乙二醉（乙烷-1, 2-二醉）具有甜味而乙醇没有甜味，因此，醇基团被认为是维持甜味分子的最低要求。对于碳水化合物來说，相邻碳原子上的一对羟基（即一个乙二醇基团）被确认是AH、B单元，其中一个羟基作为AH, 而另一个羟基上的氧原子作为B (图丨-4)。甜受体结合位是以氢键与甜分子相结合的，因为它含有与AH、B系统相反的结构基团，如酰胺（N—H)和羰基 (C=0)结构以及羟基氨基酸等。Suami认为，L -丝氨酸和L -苏氨酸单元均可作为甜受体蛋白a-螺旋的端残基来充填该甜受体，在此NH2基作为AH， 0H上的氧原子作为B (图1-4)。需要指出的是，在碳水化合物结构中所有乙二醉单元的任一羟基均可作AH或B单元（假如它们可互换的话），但并不是所有的甜味化合物（包括氨基酸）都是这样的，这就解释了为何D-型和L-型氨基酸的甜度不同，而D-糖和L-糖的甜度相同这一事实。
在脉冲前，细胞经二硫苏糖醇（di丨hiothrehol，DTT)处理或在样品中加人载体DNA都+能提高转化率。用标准醋酸锂程序（standard lithium acetate procedure) 将线性PCLRE2转化至CandUu utULs得到的转化率非常低，1网DNA的转化体不到10个。
图2 -93带有芳香箪闭取代基二肽甜味剂的L-型构象图
如图2-75所示，一种称为“后向旋转”（rHminvereo)的肽改性法，是将酰胺结构中通常的羰基和含氮基团颠倒过來。在现有条件下，是连接于内二酸衍生物上已被酰化的1，1 - 二氨基烷烃来代替通常的酰胺键连基团。D-丙氨酰胺经后向旋转后得到的化合物，其甜度可增至900倍（表2-51)。2, 2, 5, 5- 四甲基环戊基化合物[94]的甜度很大，而2, 2, 4，4 -四甲基-丨hietane [96]的甜度要弱一些。1, 1 - 二氨基烷烃部分的R或S立体异构体[94]与 [95],它们的甜度相似，但是，经二甲基化后的化合物[97]，其甜度只有 [94]的一半。对于小基闭（如平基）来说，只要立体化学上允许就可进行双取代。这对于以低成本的外消旋丨，1-二氨基烷烃来制备这些甜味化合物，具有重要的实际意义。很显然，甜受体在接受“上面”基团时具有一定的灵活性。
构建的pRMll和pUMll中包含细菌质粒序列，因此经Bgl II酶切去除细菌序列实现线性化后将促进载体在目标部位通过单交换取组（single crossover recombination)进行的整合，分别以质粒pCLRM216和pKMl 1所含的rDNA片段和质粒pUMl 1所含URA3基因片段作为同源重组整合的目标序列。