坡头区索马甜
当单糖专一性果糖转移酶以固定化酶的形式使用时，尽管此时酶的活力只有 自由状态下的80% ,但固定化酶的使用却可以防止酶制剂对产物S -6 - a造成的 污染，实现酶的蒉复利用。更为重要的是，它还可以将S-6-a的得率提高到 80%左右。此外，提高单糖专一性果糖转移酶的浓度，还可以使反应时间降低 到5h。
阿斯巴甜水溶液在一定的温度和酸性pH条件下，其酯键能被水解生成天冬 氨酰苯丙氨酸（Asp-Phe)和甲醇。在中性、碱性（pH >7)或受热条件下， 或经环化作用消去甲醇形成环天冬氨酰苯丙氨酸，即二酮基哌嗪（DKP)。最 终，天冬氨酰苯丙氨酸还会继续水解生成2个单独的氨基酸一天冬氨酸和苯丙 氨酸。
在设计三氧蔗糖的制备过程中，首先要选定一个蔗糖C-6位羟基被保护的 反应中间物，该中间物要求位于蔗糖C-4、1\ 6,位上的羟基可以被选择性氣 化，而其他位置上的羟基则不是很活泼。如前所述，最常用的保护法包括醚类、 缩醛（酮）类和酯类3类。单独保护蔗糖C-6位上伯羟基，最适用的方法是酯 类保护法，因为它兼具引人方便、在所葙反应条件下稳定以及易于除去等优点。 在酰化反应中，能使生成的蔗糖酯对氣化试剂稳定、最后易于水解除去的任何酰 化试剂都可以使用，通常选择相应酸的活泼衍生物作为酰化试剂，其中最常用的 是酰基酐或酰基卤。对蔗糖来说，形成乙酸酯或其他羧酸酯娃最有效的保护醇羟
有一篇H本专利描述了结合使用酸的钾、钠盐与氨基酸能缩短味觉持续时 间，但该专利不是针对T.donie/Zi〖提取物，而是指姜货属植物。
TB2bl -44的产物经纯化后得到三种嗦吗甜组分A、B和C (图5-9), 它们与天然嗦吗甜组成略有区别。这是由于在质粒构建时，在表达盒中采用了 两个串联重复的Lys-Arg序列，使KEX容易识别，从而对B2 -嗦吗甜融合蛋 白进行切割释放嗦吗甜。因此在KRKR序列不同位点切割后产生这三种组分, A组分为嗦吗甜II末端加了一个Arg,占丨8%~20%; B组分为嗦吗甜II末端 加了 LyS-Arg，占75% - 78% ； C组分为嗦吗甜II末端加了 Arg - Lys - Arg, 占3% ~5%。由于TG丨)Th-4上淸液中嗦吗甜的结果相同，这三种形式的纯嗦 吗甜都有甜味。
第二步，制备6-甲基-3, 4-二氢-1, 2，3-1嗯噻嗪-4-酮-2, 2-二 氣化物。取一定量的三氧化硫溶液（20%)，快速搅拌（800r/min)下，约 15min滴入上述溶液中，继续环化一定时间。约20min内，滴加三氧化硫4倍物 质量的蒸馏水，调整水解温度，继续髙速搅拌一定时间，停止反应。反应方程 式为：
{三）稳定性纽甜在千燥的贮藏条件下很稳定，在室温和干燥的条件下货架寿命可长达几 年。它的单水合物不会吸湿。如表2-23和图2-38所示，在水相溶液中，纽甜的稳定性会随pH和温度 的改变而显著变化。与阿斯巴甜类似，纽甜在？1?.0~5.5范围内相对稳定。在 0. lmol/L磷酸盐缓冲液中，PH4.5时，25弋下纽甜的半衰期约为30周，4(^下 约为45d，80T下约为40h; PH3时，25T下纽甜的半衰期约为11周，40T下约 为22d，80弋下约为24h。使用纽甜增甜的食品，可以进行高温短时（HTST)杀 菌处理。例如，在80弋下加热30min，pH3溶液中纽甜的保留量为98. 6%，这说 明80弋加热30min并没有对纽甜造成实质上的损失。而在pH4.5时，纽甜的稳 定性最高。由于这一 pH正好处于酸奶的pH范围内，因此纽甜在酸奶中有很好 的稳定性（图2-39)。PH7时，25T下纽甜的半衮期为2周，40弋下约为3d, 80T：下约为4h。表 2-23在不同pH和温度下纽甜的稳定性注：?利用0.丨nwl/L磷酸盐缓冲溶液调节pH.-在酸性环境中，纽甜具有与阿斯巴甜大致相同的稳定性；在中性环境中，纽 甜要比阿斯巴甜稳定得多。例如，在PH7环境中，51时纽甜的半衰期为124d, 阿斯巴甜为36d; 30弋时纽甜为6.6d，阿斯巴甜为丨.5d; 70T时纽甜为13h,阿 斯巴甜为丨h。纽甜分解过程是一个拟一级动力学过程。如图2-40所示，在水相体系的酸 性和中性环境中纽甜的主要分解途径是，甲酯基水解为二甲基丁基天冬氨酰笨丙 氨酸（DMB-Asp-Phe)和甲醇（MeOH)。I)MB - Asp - Phe无甜味，因此在转 化后期可观察到甜味的减弱，但不会生不愉快的后味，W为所有的转化产物都 是无味的。值得注意的楚，主要分解产物丨)MB-Asp-Phe也是纽甜在人体内的 主要代谢产物。如图2-3所示，对于阿斯巴甜来说同时存在2个分解途径：一 条途径与纽甜完全相同，即甲酯基水解为天冬氨酰基苯丙氨酸（Asp-Phe)和 甲醉（MeOH);另一条途径主要发生在中性或碱性环境中（pH >5)，这是 一个环化反应消去甲醇形成环天冬氨酰基苯丙氨酸[C-(ASP-Phe)],即
图4-10比较了两个酶反应体系中可用简单的离心方法分离的残留淀粉量。 由于挤汛膨胀淀粉以悬浮状态存在反应混合体系中，因此大多数残留淀粉经离心 (3000g, lOmin)得到分离，而传统体系中残留液化淀粉很难分离。
从表2 -65可明S观察到，三肽化合物存在与L -天冬氨酰-D -丙氨酰胺 相似的立体定向性。表2 -65 三肽化合物的立体结构与甜度的关系
