浦北县麦芽糖醇
1969年，由于甜蜜素可能的致癌作用，导致美同国家科学院研究委员会否 决了甜蜜素的公认安全物质的地位。这一决定的依据是一家位于纽约的Maspeth 食品医药研究室的某些实验结果。该研究室的实验原料不是单一的甜蜜素，而是 甜蜜素与糖精的混合物。但是，后来其他人重复这个实验时，并没得出与之相同 的结果。
转糖苷反应的产物结构
目前已有多种含巯基试剂如氧化型谷胱甘肽和胱氨酸用于蛋白质折黉复性， 其中采用胱氨酸比用氧化型谷胱甘肽成本低。将含巯基化合物胱氨酸合成蛋白 质-巯基半胱胺化合物阻隔游离的蛋白质巯基，这样可以有两个好处：变性蛋A 的水溶性敁著提高；只有加人弱还原剂后巯基才能进行相互交换。用还原型胱胺 化合物从变性蛋白质生产天然嗦吗甜的折叠过程如图5-5所示，最终得率提高 至约5pg/mL (25%),可以用品尝试验测定。酵母嗦吗甜A、B折垒复性的得率 较低，酵母嗦吗甜I不能折奋成天然（甜味）构型。酵母嗦吗甜的N端氨基酸 (一内氨酸）虽被乙酰基阻隔，但经-?系列试验证明这种修饰对蛋白质折替及甜味 没有影响。这些结果表明：嗦吗甜丨和A的另一个不同的氨基酸即第113位的 氨基酸可能不是天冬酰胺而是天（门）冬氨酸。
Seville橘子产量较小，因此大量的新橙皮苷最好由柚苷（IV)合成而得， 其反应过程见图4-32。根皮乙酰苯-4'新橙皮苷（VI)，是个很有用的中 间产物，可用来替代黄烷酮及其衍生物。在充满氮气的容器中加热柚苷（17g)、 水（175mL)和氢氧化钾（50g)混合物，回流3.5h,冷却后中和之，生成淡黄 色沉淀物（\U)，再用水结晶两次可得到无色针状晶体（熔点164 ~ 1651,产景 6. 6g)0若用丙酮结晶，则可得熔点为256?257弋的晶体。图4-32 从柚苷向新橙皮苷的化学转化图
有人对此法进行改进，采用了加压合成的工艺，当原料配比（环己胺： 氨基磺酸）为4:1,反应压力为0.2MPa,反应温度为165T,反应时间为 4h,甜蜜素的产率可高达98. 1%。该方法可以克服常压法所带来的焦结或 反应速度慢的问题；也避免了使用其他高沸点溶剂所带来的纯化产品和回收 溶剂问题，具有反应平稳、副反应少、反应时间短、产率髙等优点，有工业 化实用价值。
从植物中分离得到的Brazzein有几种结构，其中主要构型中的末端氨基酸 是焦谷氨酸（pGlu)[围5-24 (1)]0另一构型除末端没有该氨基酸外，其 余均相同，称为de8-pGlul -Brazzein [图5-24 (2)]t它的甜度是主要构型 的Brazzein的2依。按des - pGlul - Brazzein的氣基酸序列采用大肠杆菌优选 密码子合成的基因如图5-24 (3)所示。合成的Bra^ein基因若直接克隆至 质粒 pET-3a、pET-9a、pET - 1 la 和 pET - 16b 得到的 Brazzein 表达水平均 很低，只有pET-3a和pET-9a得到少量可溶的Brazzein。pET载体通常能使 外源可溶性蛋白如葡萄球菌核酸酶表达，葡萄球菌核酸酶与Brazzein的显著不 同是葡萄球菌核酸酶的氨基酸数目>100，且没有半胱氨酸或半胱氨酸含S很 低。若采用两种基因融合生产目的蛋白融合体的表达水平较髙，因此将 Brazzein合成基因插人葡萄球菌核酸酶表达系统。该策略经大肠杆菌生产鸟类 卵黏蛋白区证实很成功。
奇异果素存在于果浆，不溶于水。曾有研究用含有高碱性化合物如鲑精蛋白 (Salmine)或精胺的碳酸盐缓冲液（PH10.5)进行提取，这样容易导致变味活 力的下降，而且溶解了多种很难去除的深色物质，无法得到高纯度的样品。奇异 果素能用0. 5mol/L酸性NaCI溶液提取，这样得到的奇异果素在酸性pH中很稳 定，并且提取液无色。Sarroch Theerasilp和Yoshie Kurihara开发了奇异果素的提 纯工艺：冻干的果浆中的活性成分经0.5mol/L NaCI酸性溶液溶解抽提后用 (NH4)2S04分级沉淀，沉淀再经CM - Sepharose离子交换色谱和CcmA - Sepha- rose 4B柱提纯。用该方法得到的奇异果素纯度非常髙，得率为20g冻干果浆提 取得到36mg产品（表5-18)。
(一）产品的制备
以达到甜味提供f方便。诸如往糖楮中添加0. 33%嗦吗甜的混合甜味剂味觉特 性很好，而这种添加量水平的嗦吗甜还不足以提供明显的甜味，但它带有持久微 弱的甜味正好掩盖了糖精的苦后味。
