宾阳县果葡糖浆
通过研究发现核糖体L41蛋白中的第56位氨基酸决定了酵母对CYH的敏感 性或抗性。56位氨基酸为谷氨酰胺时该蛋白为抗性蛋白，56位氨基酸是脯氨酸 时为敏感型蛋由。这也在CYH抗性酵母Candida mallosa、Kluyveromyces lactis和 Schwanninomyces cerevisiae 的 L41 蛋白得到了证实。对于 CYH 敏感型 Saccharomy- ces cerevisiae^将其L41蛋白第56位氨基酸的密码子用谷氨酰胺的密码子替换后， 细胞就具冇了 CYH抗性。
(三）二氢查耳酮的能里新橙皮苷二氢杳耳酮（n)的能量值小于8.36J/g。这个数值是根据以下假 设（未经实验证实）估算的：糖基以水解方式分解而糖苻基基本不参与代谢。 由于其甜度大，因此n的能摄值为蔗糖的1/1000或更小。
给试验动物的膳食中添加的纽甜浓度超过0.05%?3. 50%的范围时，食物的 可口性就会降低，从而导致动物拒绝进食或食后溢出，这与所给的动物每千克体 重的纽甜剂量无关，而与膳食中纽甜的浓度有关。例如在13周的试验中，因为 随着动物体重的增加，膳食中纽甜的浓度要不断增加以维持试验要求的以千克体 重为基础的剂萤，所以当纽甜在睛食中的浓度从50g/kg (膳食的5%)降到 35g/kg (膳食的3.5%)时，狗实际上消耗了更多的纽甜。用纽甜对年幼大鼠 (1~13周）所进行的1年或2年的试验，没有发现与纽甜有关的食物消耗或食 物转换效率的改变，因为生长期的年幼动物当其生长的生理需要战胜了可口性差 的膳食时，它就会“饥不择食”。
差异可能是前文所说的原因：产物Z - Asp - PheOMe和PheO.相互作用，形成 了不溶于水的类盐物Z - Asp - PheOMe ? PheOMe,怛它在水相pH6时会部分分 配在有机相中。
Dong - Chan等用Bacillus macerans的环糊精葡糖基转移酶，以挤压膨化淀粉 为糖基供体，采用非均匀酶反应体系，对甜菊苷进行转葡糖基反应。对非均匀酶 反应体系和传统反应体系进行了比较，并确定了甜菊苷的转葡糖基的最优反应 条件。
③使大B链片段Glul - Gly41和另外一个B链片段Pro42-Trp72片段反应， 生成全长B链；
(-)高甜度二肽同型物Searle公司最早的文献发表一年内，所发现的全部二肽甜味剂，其甜度均小 于阿斯巴甜甜度的两倍。最先发现的髙效二肽甜味剂，是L-天冬氨酰-D，L- 氨基丙二酸二酯。表2-49所示为反映“下面”酯基团重要结构特征的例子。 经适度取代的刚性基团（Rigidgroup)可得到最大的甜度，例如[70]环己基在 C-2位上的甲基化[71]能使化合物甜度大为增强，但在C-3或C-4位上的 取代[72]和[73]，并没有这种效果，这显然是由于受体在立体空间中不能很 好地接受这些位置上的取代基。刚性二环葑基酯中与酯氧原子的/? _原子经充分 取代所得化合物[74]，其甜度很大。系统比较四种可能的葑醉衍生物[74] ~ [77],可知它们的甜度范围高达1000 ~5_倍。
质粒pET-3a/SNase-SW转化至大肠杆菌BL21 (DE3) /pLysS菌株进行表 达。采用pLysS菌株可以消除引人前核酸酶的不利影响，更有利于核酸酶- Brazzein融合蛋白的表达。转换后在37T加人100|xg/mL阿司匹林、34jjig/mL氣 霉素的Luria培养基（LB)中培养一段时间后，加人IPTG后培养2~3h，大肠 杆菌中分子质萤23ku的融合蛋白产量达到最大，多数在内含体沉积，在16%的 Tricine凝胶中50%?70%的融合蛋白不溶。内含体蛋白经电泳凝胶提纯后，大 部分融合蛋白重新折黉(refolded),提纯纯度> 80%。经CNBi?处理后， 50%?70%融合蛋白发生解离，这说明融合蛋「丨不能完全解离。因Brazzein酸性 较强，p/约5.4，而核酸酶碱性较强，p/9.4，因此融合蛋白解离后用阳离子交 换色谱即能分离产物。纯化得到的重组Brazzein具有较高纯度及正确的分子质量 (6.4ku)0解离后得到的肽链与^-pGlul -Brazzein序列相同，甜度是植物提 取Brazzein的2倍，与从植物中分离得到的如-pGlul - Brazzein甜度相当。已 研究表明蛋白质只有在折垒正确时才具有甜味，未折垒(unfolded)或折奋错误
在d-丙氨酸酰胺和后向旋转酰胺中的酰胺基团，属于甜二肽结构m中较大 的1^2基团，但它也可占据小基团R,的位罝。表2-52列出的[99] ~ [102] 是D，L-氨基丙二酸酰胺酯。[99] - [101]带有分支的环状酯基团，具有很 强的甜度，而与之相关的单甲基酰胺[102]的甜度却要低搿多。甜度降低的原 因是由于(+) -?葑醇异构体的存在或酰胺氢的不利影响。相比之下，用酰 胺、甲基酰胺或二甲基酰胺取代阿斯巴甜中的甲酯，会导致甜味丧失。
