英山县水苏糖
将合成的嗦吗甜基W在啤酒酵母中进行表达，通过酵母直接分泌或变性嗦吗 甜折奋复性的方法，得到了具有甜味构型的嗦吗甜。通过测定植物嗦吗甜分子的 氨基酸序列，发现与已报逍的嗦吗甜丨、n有一定的区别。
①环状结构变小；②与酰胺连接的碳原子上带有小分支链；③向碳环上引入硫原子。
关于甜叶菊甜味成分的研究，1908年就有Reseneclc等人的报道。1931年 Lavielle从甜叶菊中分离出甜菊苷，分析它是由1分子甜味菊醇和3分子葡萄糖 组成的糖苷。后来，经众多研究确立了甜菊苷的分子式。日本还最早分离出甜菊 叶子中的其他几种成分，包括甜菊双糖A苷、B苷、C苷、D苷和E苷等。1985 年Kinghoron等人的分析认为，甜菊叶子中含有双萜、三萜、固醉、类黄酮、单 宁及挥发性油等31种成分。日本甜叶菊公司认为，挥发性芳香油、单宁和类黄 酮等是构成甜叶菊提取物不良风味的主要成分，称为“甜味质萤影响因子”。也 有人认为，甜叶菊的苦味是由于倍半萜内酯引起的。
要在酵母中表达嗦吗甜，首先要合成相应的基因。为使基因能在酵母中高效 表达，采用酵母优选密码子合成嗦吗甜I基因，为便于操纵DNA序列，在嗦吗 甜基因设计时在序列中包含多个限制性酶切点。嗦吗甜I基因长度为630bP,它 的DNA序列的5'端和1端分别为Bel I位点和Xho I位点。嗦吗甜I合成基因经 直接定点突变或DNA片段替换合成嗦吗甜A、B基因。将嗦吗甜I基因113位 的天冬酰胺的密码子替换为天冬氨酸的密码子即得嗦吗甜A基因序列，随后将 嗦吗甜A基因46位的天冬酰胺的密码子替换为赖氨酸的密码子即得到嗦吗甜B 基因。
(五）酰基供体和酜基受体的比例对反应产率的影响保持/V-C3Z-L-Asp (OEt) OEt 0.5mmol 不变，改变 D-AUNH2 的谊， 得到不同比例的酰基受体D-AUNH2和酰基供体W-CBZ-L-ASP (OEt) OEt。 如图2-68所示，反应产率随宥酰基受体/酰基供体比值的增大而增加直到其比 值为1,在其比值大于1以后，酰基受体/酰基供体的比值增大不会提高反应的 产率。图2 - 68 不间酰箪受体和酰基供体摩尔比对反应产申的影响 注：丨2%的水、9%的DMS0和丨8%的MEA为辅助因子，丨5%的a -胰凝乳蛋白期.反应8h,
阿力甜（Alitame)是由L-天冬氨酰、D -丙氨酸和C -端酰胺3部分组成， 它是用酰胺键替代阿斯巴甜分子中不稳定的酯键，使得化学稳定性得以显著提 高。用阿力甜增甜的部分酸性饮料，经长时间f*：存后会出现一些不配伍现象，感 官分析发现有明显的硫味。液体产品中可与阿力甜反应产生异味的物质，多数是 H202或NaHSO;等。截止2008年，阿力甜尚未被美国FDA认可，全世界只有中 国、澳大利亚和墨西哥等少数几个国家批准使用。1996年，JECFA确定的阿力 甜AD丨值为1 mg/kg。
②在此基础上，通过合成B链的Glul -Pn?20和Cyc21 -Gly41片段，获得 大B链片段——Glul - Gly41 ；
Searie公司的研究人员最早对二肽分子的结构差异做丫研究，发现C -端氨 基酸可用一系列简单的胺分子来替代。为叙述方便，通常将二肽分子的结构特性 归纳为纸平面上的两个基团R,和R2, R,指“上面”基团，比指“下面”基团。 如表2-41所示，化合物[2]是由苄胺衍生而来的，缺少a-取代基R,,所以 没有甜味。由苯异丙胺衍生而得的氨化物[3]具有甜味，这说明酯基团并不是 必需的。同样是由苯异丙胺衍生的氨化物[4]却无甜味，这与阿斯巴甜甜二肽 分子L-或D-苯丙氨酸所表现的差异性，反映出对立体化学的要求是一致的。 在表2-41列出的K,基团（H、CH2OH)中，甲基具有的甜度最大，这表明较
④YPD平板培养基上期落数计为活细跑数。
