东区D-木糖
4葡糖基化的研究发现，在丨3位引入2个 葡糖基后甜味特性明显改善，而在19位上引人 葡糖基则使甜味特性变差。甜菊醉双苷（结构式 如图4-6所示〉，经环糊精葡糖基转移酶催化在 13位引人葡糖基，其19位由半乳糖醋键保护，结 果发现增加1或2个葡糖基会使甜度有明显增加，
融合蛋白提取过程中应加人一定量的钙离子，这样能稳定和活化核酸酶。当 不加钙离子时，融合蛋白提取得率很低，这表明核酸酶活力增强会增加融合蛋白 在内含体的溶解庞。
(-)高甜度二肽同型物Searle公司最早的文献发表一年内，所发现的全部二肽甜味剂，其甜度均小 于阿斯巴甜甜度的两倍。最先发现的髙效二肽甜味剂，是L-天冬氨酰-D，L- 氨基丙二酸二酯。表2-49所示为反映“下面”酯基团重要结构特征的例子。 经适度取代的刚性基团（Rigidgroup)可得到最大的甜度，例如[70]环己基在 C-2位上的甲基化[71]能使化合物甜度大为增强，但在C-3或C-4位上的 取代[72]和[73]，并没有这种效果，这显然是由于受体在立体空间中不能很 好地接受这些位置上的取代基。刚性二环葑基酯中与酯氧原子的/? _原子经充分 取代所得化合物[74]，其甜度很大。系统比较四种可能的葑醉衍生物[74] ~ [77],可知它们的甜度范围高达1000 ~5_倍。
四、甜菊双糖伴的安全毒理学分析
一、二氢查耳酮的种类、来源与结构
大约与此同时，意大利的研究者描述了对阿斯巴甜蛋氨酸二肽化合物构象优 先性的研究结果，认为丨^口^是其优先存在的构象。Lelj等人依据阿斯巴甜的 FiDn构象优先性，提出一个具有普遍意义的甜受体结合模型，这其中有改进的 地方是将AH-B部分翻转了 180%这个模型能合理解释阿斯巴甜的D，D和L， D非对映体为何具有苦味。在任何情况下，每一种甜味化合物都能从Shallenberger 阻碍层的对面去接近甜受体，假定这个阻碍层是完全打开的。
各质粒的启动子分别是：zlcre/no/iium chrysogenum的B2广谱醋酶基因 (cesB )的后动子(pBKThb )、PeniciUium chrysogenum的异青毎素合成酶 (pcbC)启动子（pCKThb)、Aaimmon的谷氨酸脱氢酶基因（gdhA)后动子 (pGDTli)和/的3 -磷酸甘油醛脱氢酶基因（gpdA)启动子 (pGPTh)。各质粒$至经ble标记选择得到的/l.a?;amon>/66菌株，该菌株没有 曲霉蛋白酶 A (aspergillopepsin A, PepA)活性。
由于莫奈林分子中较为稳定的a-螺旋结构含量较少，其完整的三级结构因 而较易受到各种变性剂的迅速破坏。变性的结果导致了三级结构的无序化，分子 甜味随之丧失。但构象上的轻度变化是可以容忍的，并不会导致甜味的完全消 失。用十二烷基硫酸钠或50%乙醇溶液处理，造成货奈林蛋白质变性并失去了 甜味，分子中a-螺旋结构的含量有所增加。但用25%乙醇溶液处理，不会引起 构象和甜味的变化。莫奈林对碱十分敏感，值单独由于喊引起的变性而造成紧密 肽链结构的伸展现象还是可逆的。例如，pHlO.9环境下引起的变性，当用酸调 节至PH3.3时，其三级结构仍可恢复。此时，尽管分子的整体构象并没完全恢 复，但甜味却部分恢复了。
(3)以环己胺和氨基磺酸铵为原料
(一）Brazzein的化学结构
