峨山县木糖
注：反应条件：乳糖a28mol/L.甜叶愚钩子苷0. 14raol/L。
人们很早就认识到一种味可与另一种味相互作用，如果是两种味同时刺激受 体时更是如此。对混合刺激物深入细致的研究表明，甜味能减弱苦味。反过来也 是这样，一个单一的刺激物对另一种刺激物的影响符合一个简单的对数比例关 系。但是，如果刺激物彼此暂时分开，则会出现“适应”现象，前面的甜味刺 激会使随后的苦味更苦，其总体效果视刺激物是否相同而定。如果具有物理持久 性的甜味刺激物分子首先出现在口水中时，按照给予刺激物溶液的体积不同，其 适应现象易受影响。但令人奇怪的是，文献报道的多数心物学味觉研究均忽视了 溶液体积这个因素。通常认为基本味的响应强度只与所提供溶液的浓度有关，而 持久性与浓度、体积均有关系。当摄取了简单甜分子（如葡萄糖）水溶液世达 250mL时，其在口水中的持续时间至少有30s。然而，这个持久性只不过与刺激 物的开始下降（initial decline)情况有关，它必须同味觉持久性这个概念区分开 来，味持久性与离子载体附近的刺激物分子浓度集中引起的持续现象冇关。对一 种特殊形式的甜味剂，若事先能够仔细分析其时间与强度这两个因子的话，那么 基本味的相互作用显然对加工工艺是有利的，只有分别定量测出这些因子，才会 找到味改性所需的有效分子。此外，必须把每个因素都肴成是影响甜味的整个化 学接受过程中的一个内在特性^
由于弱酸高温环境中，4-PAS会发生脱乙酰基反应，或进一步发生迁 移反应得到3，4，6, 3\ 4'-五乙酸蔗糖酯，我们改用碱性乙酰基迁移法。 其反应温度为30 -601，反应温度高于601时副反应发生几率增多，低于 30弋反应过慢（如>10h),我们选取50T为试验温度。具体方法是，20g
将50gTRISPA (0. 039mol)溶解在lOOmL 二氣丨t丨烷中，加入25mL乙酸， 降温至(TC后加人10mL浓盐酸，0T冰水浴、磁力搅拌下反应2h。加人处理过 的树脂于反应物中搅拌lh，过滤除去树脂后真空浓缩。200mL甲醇加人上述浓 缩浆液中，待完全溶解后降温至0T，磁力搅拌下反应3h。过滤出27. lg三苯基 甲醉沉淀物，滤液用活性炭脱色后真空浓缩，用乙醚结晶，得到19.8!?白色针状 物质，为2，3，4, 3、4'-五乙酸蔗糖酯（4-PAS)，得率为92%。
(-)蔗糖8个羟基团的完全保护
在KOH作用下，氟磺乙酰乙酸胺分解出氟化物，可环化成二氢氧硫氮杂环 二氧化物，由于二氢氧硫氮杂环二氧化物酸性强，与KOH作用易生成盐类。当 然也可用NaOH或Ca (0H)2代替KOH生成相应的盐类产品。安赛蜜的幣个合 成途径见图6-25。
图5 - 17 电脉冲转化后培养时间对转化率的影响 注：①细胞与切后的pCLRE2混合后泾电脉冲.电脉冲条件：电容25?tF,内? 100011, 场强 0. 5kV/cm。
经RNA印迹分析知tha基因在各转化体中的转录水平，比对照<4. nidulans的 芦-肌动蛋白的髙。双转化体TB2bl -44 -GD5的嗦吗甜基因转录水平最高， B2-嗦吗甜融合mRNA转录大小为1.9kb，与预计结果相同。以pcbC为启动子 的TCTh -2转化体的表达盒中该DNA片段对应的B2基因5,端只有105bP而不 是其他表达盒中的615bP,因此转录的B2-嗦吗甜mRNA较小（1.4kb)。狹线 印迹分析发现在转化体TGDTh-4、TB2bl -44、TGP -3中的嗦吗甜mRNA水平 在24~48h内最商。转化体TCTh-21 (启动子为pcbC>在整个发酵过程中的表 达水平都很低。
