武汉市爱德万甜
6.药理学试验
阁5-3 带嗦吗甜基因的质粒图 注：在大扬杆菌中选择性标记为Wa.在酵母中为fcu2-rf;在醉母中2-micron、ori Y和PAT153中的 oW 分别给解母和大肠杆两提供了复制功能。
化学法合成阿斯巴甜，一般包括以下5个步骤：
当同一分子中有几个羟基时，三苯基氣甲烷、叔丁基二甲硅醚氣化物和二异 丙基硅的氣化物可优先与伯羟基反应，可达到选择性部分保护的目的，其中三苯 甲基很广泛地应用于糖、核苷和甘油酯化学中用来保护伯羟基。选用三苯基氣甲 烷与蔗糖反应时，由于三苯甲基体积较大而产生空间位阻，只能取代6、r和6' 三个伯羟基上的氢原子，生成6, \\ 6'-三苯甲基蔗糖醚。而相对比r位活泼 的4位仲羟基，因三苯甲基的分子基团过大，难以被活化而不参加反应。三苯甲 基醚通常由多元醇与近计算最的三苯基氣中烷，在吡啶溶液中室温或髙于室温反 应来制备。研究表明，如用二甲基甲酰胺代替吡啶，并使用叔胺（如/V-甲基吗 啉）或聚合胺（如2-聚乙烯吡啶）作为酸清除剂，可在较低成本的基础上提髙 产率。三苯基醚可溶于多种非极性有机溶剂中，它对碱和其他亲核试剂稳定，但 在酸性介质中不稳定。
在mGluRl的活性形态（开-合）中，其两个活性位点都可容纳一个谷氨酸 分子。但是，由于甜味剂大小和化学组成的多样性，研究人员还未能确定在这些 甜味受体中，两个配体结合部位是否可以与Aoc - AB和Aoc - BA活性形态中的 甜味配体结合。Morini等考察了大班甜味剂在这些模型的每一个空穴的结合情 况，结果发现闭合的原体——T1R2 (A)和T1R3 (A)的活性位点太小，因此 不能容纳大多数大的合成甜味剂。如图1-29所示，在mGhiRl中，闭合的原体 (M0L1)和打开的原体（M0L2)都与谷氨酸在由亚结构域LB1和亚结构域LB2 分界面为边界的活性位点结合。两者惟一的区别是，在打开的原体中，分界面 LB2并不参与结合。相反，由于一些甜味剂比较大，Aoc-AB和Aoc-BA中的 打开的原体的活性位点都包括了 LB1和LB2的分界面。选择通过对接来探测结 合情况的甜味剂均为不同种类甜味剂（包括糖、二肽和超级甜味剂）中的典型 代表。在原体的活性合-开状态下，研究人员发现，打开的原体的结合部位可能 符合许多典型的甜味化合物。相反，至于闭合的原体的结合部位，研究人员却难 以实现其与许多较大配体的对接。
上述大部分试验是在20世纪60 ~ 70年代进行的。1985 ~ 1986年间，荷兰 TNO - CIVO毒理与营养学研究所对新橙皮苷二氢查耳酮重新进行了一次彻底的 亚慢性（13周）小鼠毒理实验。在该研究中，雄、雌性Wistar小鼠每20只为一 组，在91d的喂养期间，新橙皮苷二氢查耳酮D的添加剂量分别为0%、0.2%、 1.0%和5.0%。结果只在5%剂萤组出现一些变化，诸如出现着边（炎症初期 时，白细胞黏着于血管壁）、体重与饲料采食萤发生变化，盲肠增大，以及临床 化学参数发生轻微变化等。这些现象的出现，说明化合物n只表现出很轻微的毐 性作用。其余的剂量组，未发现任何异常。所有剂量组在动物眼科、血液学和组 织病理学方面，未出现任何异常。这个试验表明，对中等剂量组，换算成每天每 千克体重的剂量是750mg，是安全的。根据这个以及上述早期的试验结果，欧共 体食品科学委员会于1987年承认新橙皮苷二氢查耳酮的食用安全性，并提出其 最大的ADI值为5mg/kg。对于大多数的食品用途来说，这个ADI值是足够的。
与其他髙效甜味剂一样，三氣蔗糖对蔗糖的相对甜度会随溶液浓度而变化。 对4%蔗糖溶液来说，三氣蔗糖的相对甜度是800倍；但对10%蔗糖溶液来说， 其相对甜度仅450倍。环境pH及其他可能存在的食品成分，均会影响三氣蔗糖 可感知的真实甜度。
因为所有的动物体内研究，包括长达2年的慢性毒理试验均表明甜菊苷是无 毒的，因此上述的试验结果已引起人们的关注，但甜菊醉是在小白鼠体内产生 的，白鼠的微生物群系与人体的有所区别，且试验所用的甜菊苷浓度至少是正常 食品中可能使用量的丨00倍以上。在消化道内浓度的稀释必然极大地减少了可能 发生突变的机会，因此，对这个实验结果不必太紧张。
该法的主要特点是原料来源广泛、
