甘肃低聚半乳糖

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甘肃低聚半乳糖

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(二)利用基因工程法生产奇异果素
四、二氢查耳酮的安全毒理学分析
也可以通过烟草表达莫奈林。首先合成了由噬菡体PI Cre重组酶介导的特异 ?组位点丨OXP的序列,构建了两个loxP同向重复的棺物表达栽体pGLX121. 1。 PCR定点突变了 CaMV 35S启动子元件中kozak序列,使kozak中的翻译起始密码 子ATG位于Ncol位点上。把spm基因克隆到表达载体pG〖MA的Ncol和PstI之 间,给甜蛋白8pm基因加上35S启动子和polyA及NOS终止子元件,然后克隆到 PGLX121. 1的EcoRI位点上,用农杆菌LBA4404转化烟草,获得卡那痗素抗性转 基因植株,经过PCR及southern分析,证明甜蛋白spm基因已整合到烟荩基因组 内。用转基因烟草的总RNA通过RT-PCR反转录扩增spm基因,证明了在35S启 动子及其他调控元件的控制下,spm基因在转基W烟草中转录表达出mRNA。提取 转基因烟草总蛋白,经SDS-PAGE分析,初步证明了 8pm基因在转基因烟草中表 达出目的甜蛋白。
八1^0—在朽8(^1?提出的甜二肽分子基础上,扩展了 Kaneko的氨基酸立体 化学模塑(图2-74中的IV)。在这个模型中,NH/和C0/基团连接于甜受体 上,侧链R对甜度影响很大。例如,甘氨酸(R = H)和D-丙氨酸[24] (R = CH3)只有较弱的甜味,而D-色氨酸[25] (X = H)和6-氣-D-色氨酸 [25] (X = C1)的甜度分别是蔗糖的35和1300倍。甜度的增加是由于K基团 与受体之间存在着疏水链和色散力的缘故。对于甜二肽V來说,分子下半部第 二个氨基酸占据了 IV中氨基侧链R的位罝。这样,AH-B基团仍是NH/和 C00 ,虽然其间隔要远一些,但仍在Shallenberger和Acree定义的0.25 ~ 0. 40nm范围内。IV中氨基酸手性中心基团的定位与二肽V和VI中天冬氨酸手 性中心的一样,只不过前者是D-型而后者是L-型而已。事实上V和VI中的 竣基团是侧链的一部分(VI中是R基团),这反映了立体化学分配上的变化 情况。
(一)糖精的代谢
图3-10所示为20弋、pH分别在2.75、3.1和7.6条件下,相对于4% ~ 12%
④ PheOMe、Z - A*p 浓度分对为 200mmol/丨.和 80mmol/L。
将莫奈林分子A、B肽链拆分开后其甜味丧失,单独的A或B肽链即使浓度 很高也没有甜味。将被拆分的A、B链重新混合,其甜味会缓慢恢复至原分子的 12%左右。往分子中引入二硫键,甜味即丧失,经二硫赤藓糖醇还原后,甜味随 之恢复。通过化学法将B肽链中惟一的一SH (半胱氨酸)衍生化,不论衍生后 基团的大小与带电情况如何,分子甜味均丧失。尚不淸楚的是,这个惟一的半胱 氨酸娃在蛋白质分子与甜受体相结合时起重要作用呢,还是由于一SH基团的衍 生化而改变了分子的基本构象呢?莫奈林所具有的抗原激活特性,也会随 着一SH基团的屏蔽或A、B链的分开而钝化。

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