澄迈县糖精钠
(二）甜菊苷向甜菊双糖A苷的转化1977年，日本田中等人成功地通过酶水解，将甜菊苷转化成另一种天然双 蔽苷Ru丨)usoside (我国华南地区截薇科植物Rubus suavissimus的叶子中含有这种 糖苷，参见本章第五节），然后再通过三个步骤即可转化成双糖A苷，产率为 75%。甜菊苷向甜菊双糖A苷转变的化学途径见图4-16。
经逐步稀释品尝试验测定植物嗦吗甜的甜味阈值为（2. 3 ±0.9) jig/mL,分 泌嗦吗甜及折登型嗦吗甜的甜味阈值均与植物嗦吗甜的相近。
奇异果素存在于果浆，不溶于水。曾有研究用含有高碱性化合物如鲑精蛋白 (Salmine)或精胺的碳酸盐缓冲液（PH10.5)进行提取，这样容易导致变味活 力的下降，而且溶解了多种很难去除的深色物质，无法得到高纯度的样品。奇异 果素能用0. 5mol/L酸性NaCI溶液提取，这样得到的奇异果素在酸性pH中很稳 定，并且提取液无色。Sarroch Theerasilp和Yoshie Kurihara开发了奇异果素的提 纯工艺：冻干的果浆中的活性成分经0.5mol/L NaCI酸性溶液溶解抽提后用 (NH4)2S04分级沉淀，沉淀再经CM - Sepharose离子交换色谱和CcmA - Sepha- rose 4B柱提纯。用该方法得到的奇异果素纯度非常髙，得率为20g冻干果浆提 取得到36mg产品（表5-18)。
同时，控制反应条件不仅要保证单酯化衍生物占主要地位，而且要使酯化反 应尽可能地在C-6位上发生。蔗糖的酯化反应中可优先起反应的是C-6、r和 6,位羟基，各羟基反应的活泼次序是C-6、6'>r>2。因C-6聒性与C-6位 相当，得到的只能是既有C -6'位取代又有C -6位取代及少许其他位取代的单 双蔗糖酯混合物。因此，还必须通过严格控制反应条件（如蔗糖和乙酸酐的反 应比例、反应温度和时间等），以使单酯化反应尽可能地发生在蔗糖C-6位上。
宥人们去努力揭示它，因此，尽管奇异果素未能获准使用，但仍有不少科学T.作 者继续战斗在这个领域。
由于莫奈林分子中较为稳定的a-螺旋结构含量较少，其完整的三级结构因 而较易受到各种变性剂的迅速破坏。变性的结果导致了三级结构的无序化，分子 甜味随之丧失。但构象上的轻度变化是可以容忍的，并不会导致甜味的完全消 失。用十二烷基硫酸钠或50%乙醇溶液处理，造成货奈林蛋白质变性并失去了 甜味，分子中a-螺旋结构的含量有所增加。但用25%乙醇溶液处理，不会引起 构象和甜味的变化。莫奈林对碱十分敏感，值单独由于喊引起的变性而造成紧密 肽链结构的伸展现象还是可逆的。例如，pHlO.9环境下引起的变性，当用酸调 节至PH3.3时，其三级结构仍可恢复。此时，尽管分子的整体构象并没完全恢 复，但甜味却部分恢复了。
研究甜味理论及其构效关系的目的，不仅在于阐明甜味的呈味机理，更重要 的是指导合成新型的人工甜味剂。近百年来，几种重要人工甜味剂的发现均出自 偶然的机遇，如1879年的糖精（Saccharine)、1883年的甘素（Dulcin)、1893 年的甜素（Gliicin)、1937年的甜蜜素（Cydanmte)和1965年的阿斯巴甜 (Aspartame)都是著名的偶然事件，而通过精心设计而成功发现的人工甜味剂则 几乎没有。
与【41蛋白有髙度同源性的109个氨基酸的多肽基W的阅读框架在与 RIM-C基因探针杂交的IX:域中。阅读框架中的起始密码子后即可能是367bP内 含子，据报道这是W1蛋白基因的一个特征。该内含子5,端和3,端的接合序列 分别为GTATGT和TAG，内部保守序列TACTAACA位于内含子3’端上游的31个 核苷酸。大多数核糖体蛋白质基因的上游区域布两个保守序列：H0- M0L1和RPG盒，RPG盒序列为ACACCCATACA (C/T) (A/T)。分离所得基因 在V上游有两个序列与RPG盒相近，序列一为ACACCCACCCACG (13个核苷酸 中10个相同），位于-197 ~ -179;序列二为ACACGCATACAAA (13个核苷酸 中丨1个相同），在非编码链上的-151 ~ -139。
①化学性质稳定，耐热、酸和碱，不易出现分解失效现象，故使用范围比 较广泛。
不同来源的半乳糖苷酶催化得到的转糖苷产物见表4 -23。其中K. laclis 的芦-半乳糖苷酶不对RU进行转半乳糖苷反应。环状芽孢杆菌的-半乳糖苷 酶在反应初始阶段优先将半乳糖基转移至RU的19 -羧基相连的葡糖基上，得到 以芦-1，4糖苷键连接的RGal - la,然后得到RGal - lb。RGal - la是CGTase 转糖苷的良好受体，因为其19-羧基相连的葡糖基上的C4-0H已用半乳糖基 保护。而大肠杆菌的卢-半乳糖苷酶主要将半乳糖基转移至19-羧基相连的葡糖 基上，得到以尽-丨，6糖苷键相连的RGal-2，该产物不适于用作CGTase催化 转糖苷反应的糖基受体，因糖基会优先与13-0H相连的葡糖基连接。米曲裤 {As. oryzae)和P. 的芦-半乳糖苷酶催化得到RGa丨-1、RGal - 2、
