甘州区结晶果糖
当用固定化酶在非水溶性有机溶剂中催化反应，需对多个反应参数如合成速 度、平衡得率和固定化酶的稳定性等进行综合考虑，并进行反应条件的优化。尽 管该系统中反应是在多孔载体内部的水相中进行，但水相的pH、底物、产物浓 度都难以测得。因此，只有通过分析在水/有机溶剂二相体系中游离酶催化的反 应来模拟在有机溶剂中用固定化酶催化的反应。
Sun等尝试了在转基因马铃磐中生产重组马槟榔。研究人员把全长马槟榔基 因克隆于带马铃薯块茎特异性patatin启动子和来&胭脂碱合成酶基因的终止序 列（NOS. sub. ter)或带CaMV 35S启动子和NOS. sub. tei■的栽体，并把基因和栽 体转染至马铃薯。他们用Southern印迹法分析了转基因植物并通过Northern印迹 法证实了马槟榔n被成功转录。
三氣蔗糖冇5个一0H基团分别位于C-2、C-3、C-6、（：-3'和（：-4、 其中6 - 0H位取代基对甜度的影响主要是它的大小而不是其氧原子的存在或缺 失，W为6-脱氧三氣蔗糖的甜度是蔗糖的400倍，而6-氣-6-脱氧三氣蔗糖 则只有200倍甜度；又如6-脱氧和6- 0-甲基蔗糖均有甜味，6-乙酸酯蔗糖
图4-14所示为甜菊苷转糖苷反应中，甜菊苷（葡棊受体）、环糊精、转糖 基甜菊苷的浓度变化情况。环糊精是环糊楮葡糖基转移酶催化的转葡糖基反应的 中间体，在反应起始阶段大萤积累，但12h后略有下降，该变化与挤压膨胀淀粉 直接生产环糊精不同。
1.葡萄糖浓度对发酵过程的影响
单基团保护法的核心在于蔗糖(:-6位羟基的保护，以避免该位置在随后的 氣化反应中引人氯原子带来苦味，该步骤也是以下各步反应的基础和影响终产物 得率的关键所在。这种选择性保护需要相当严格的反应条件，同时还需要有效的 分离设备，因此，蔗糖C-6位羟基的单基团保护，成为整个合成过程中对反应 条件和分离条件要求最严格的步骤。已知蔗糖具有醇的典型反应，其8个羟基的 相对活性顺序大体为V >6 >4 > r >2 >3 >3# >4'，这些羟基的反应活性不仅受 空间排列的影响，也受反应性质、反应条件（温度、溶剂、时间、反应物浓度 等）、试剂性质与活化络合物稳定性等多方面的影响。尽管各羟基（尤其是同级 羟基）之间所处的位置及活性差异不大，但只要严格控制反应条件，仍然有可 能选择性地合成部分取代的蔗糖衍生物并使某种特定的产物处于优势地位。
③蔗糖C - 3位的构型对甜味也很重要，因为C - 3位的差向立体异构体 (即异蔗糖）没有甜味。
经RNA印迹分析知tha基因在各转化体中的转录水平，比对照<4. nidulans的 芦-肌动蛋白的髙。双转化体TB2bl -44 -GD5的嗦吗甜基因转录水平最高， B2-嗦吗甜融合mRNA转录大小为1.9kb，与预计结果相同。以pcbC为启动子 的TCTh -2转化体的表达盒中该DNA片段对应的B2基因5,端只有105bP而不 是其他表达盒中的615bP,因此转录的B2-嗦吗甜mRNA较小（1.4kb)。狹线 印迹分析发现在转化体TGDTh-4、TB2bl -44、TGP -3中的嗦吗甜mRNA水平 在24~48h内最商。转化体TCTh-21 (启动子为pcbC>在整个发酵过程中的表 达水平都很低。
这样，生甜团中的AH、B就不仅仅局限在氢供体和氢受体范围，而是扩展 到所有能接受未共用电子对的电子受体和所有能给出未共用电子对的电子供体都 可以作为生甜团中的氢供体和氢受体，从而使甜味三角理论中AH、B基团的适 用范围大大拓宽。所以，在三乙酸或三硝酸甘油酯中，酮基上的C原子和硝基 中的N原子就可以以Lewis酸的形式通过接受未共用电子对而分别充当两个甜味 分子生甜团中的A。
(—)Brazzein的物化性质
