牡丹区结晶果糖
在各种致突变试验研究中，包括强致死试验、微核试验（micronucleus test)、伢髄试验、恶性转移试验、DNA结合试验等，均未发现安赛蜜有任何致 突变现象。用白鼠进行繁殖试验，表明安赛蜜对试验动物的生育能力、每窝小动 物总数、动物体苽、生长情况和死亡率等均没任何影响。
于是，他们对奇异果素做了定点突变实验。考虑到丙氨酸不会产生特殊的空 间和电子效应，他们用丙氨酸替换组氨酸-30和/或组氨酸-60。结果发现，所 得突变体和重组奇异果素的分子大小和糖链结构类似，并且每种突变体都如期地 以二聚体形式存在。有趣的是，感官测试结果显示，0.5mg/niL的H30A和H30、
(一）BraMein表达载体的构建
6.药理学试验
同时，控制反应条件不仅要保证单酯化衍生物占主要地位，而且要使酯化反 应尽可能地在C-6位上发生。蔗糖的酯化反应中可优先起反应的是C-6、r和 6,位羟基，各羟基反应的活泼次序是C-6、6'>r>2。因C-6聒性与C-6位 相当，得到的只能是既有C -6'位取代又有C -6位取代及少许其他位取代的单 双蔗糖酯混合物。因此，还必须通过严格控制反应条件（如蔗糖和乙酸酐的反 应比例、反应温度和时间等），以使单酯化反应尽可能地发生在蔗糖C-6位上。
考虑到安赛蜜水溶液温度与溶解度的关系，因此所得产品可通过重结晶方法 很容易地得到纯化，这就保证了工业化生产规模下能够制出髙纯度的安赛蜜，以 满足作为食品添加剂的纯度要求。
(一）甜菊苷的提取与精制用水提取通常选用干甜菊叶为原料采用连续提取法。欧洲一篇专利认为在 90 ~110弋之间对甜叶菊叶子进行预热处理可去除一些不受欢迎的甜味杂质，同 时还指出这过程最好在空气流、惰性气体或水蒸气中进行。还有一种去除甜味杂 质的方法是在25 ~59t的水中或丨0T以下的乙酸乙酯、二皤烷、二氣化烷、四 氢呋喃或1, 2-二氣乙烷类有机溶剂中提取。有人认为往浸出液中添加些正磷 酸盐、氢氧化钡或硫酸钡等，有利于下一道过滤工序的顺利进行。虽然日本 Stevia公司认为在100弋热水中提取也可去除甜味杂质，但他们没有说明如何从 残余的叶子中提取出残留的双萜苷。
当带嗦吗甜基因的质粒转移人酵母，在选择性培养基上培养一段时间后， 在相应的培养基中发现了甜味嗦吗甜A、B,且分子质粗均与成熟嗦吗甜的分 子质量相同。嗦吗甜I虽用同样方式生产，但没有出现在培养基中，该结果与 它不能在体外折叠相符。由此可以看出单个氨基酸变化对蛋白质结构影响 很大。
单链兑奈林蛋白已经在带有含Tip启动子的表达载体的大肠杆菌菌株W3U0 中得到生产。重组SCM与天然的莫奈林甜度相同，但是其热稳定性和酸碱稳定 性要高些。Sung等人把SCM克隆于带有T7lac启动子的{^:121载体中，同时表 达了重组SCM和SCM突变体。
2 -2 阿斯巴甜2种主要的分解途径 (1)水解生成天冬氦酰苯丙氡酸(Aap-Phc)和肀醇(McOH) (2)通过坏化作用生成《 (Asp-Phc)和甲醇 阿斯巴甜的主要分解产物图2 -4 在105?C、丨20弋和丨50尤下干燥阿斯巴甜转化成DKP的百分率 ?1 干燥状态下阿斯巴甜的稳定图2-5所示为pH、温度和时间对阿斯巴甜水溶液稳定性的综合影响。25T 时，它在PH4.3左右最为稳定，在pH3~5之间稳定性很好。图2-6和图2-7 所示为在40弋、80T及不同pH环境中该化合物的稳定性情况。在一定时间内, 通过使阿斯巴甜暴銪于高温环境中来观察其稳定性的变化情况。在图2 - 6和图
