烈山区三氯蔗糖
(二）提高反应平衡得率的途径山式（2-5)知反应平衡得率会受底物浓度5。影响。S。增大，平衡得率增 大。在 L/ [H20] =0.5 (mol/L)-1, S0 = lmol/L A,平衡得率提髙至 11.8%，与5。=0.丨》1101/1.时的平衡得率4.55%相比增加不明显。由于通常在羧 基或氨基末端有保护基团的氨基酸溶解度很低，即底物氨基酸浓度不可能增加很 多，因此通过该途径很难大幅度提高平衡得率。这里介绍几种使平衡向肽生成方 向移动的方法。
Bmzzein在氨基酸分子序列和蛋白质空间结构上与其他已知序列结构的甜蛋 白无同源性和类似性，其二级结构类似于植物抗菌蛋白y-硫素（y-丨hionins)、 防御素（defcnsins)和节肢动物神经毒素 (neurotoxins) 0由氨基酸序列预测表明，其 二级折吞构型与丝氨酸蛋白酶抑制剂结构相 似。
图6 -2至图6 -5所示为25弋、90T温度下糖精钠/钙水溶液的相对黏度、 相对密度与浓度的关系曲线。
1982年，Medon等人用大鼠对各种精制双萜苷进行了急性毒理试验，得到 与上述相同的结果。他们的结果认为，甜叶菊的任何一种甜味苷，诸如甜菊苷， 甜菊双糖苷A、B、C，甜菊醇糖苷和卫矛苷A等，以2.08/1^的剂量喂养动物 未发现任何毒副作用。根据上述的计算方法，这相当于人体可能摄人迸的480倍
Lamphear等通过转基因玉米生产Brazzein，获得了产萤髙达AOO^g/g种子的 重组Brazzein。研究人员已合成了 Brazzein基因，并把基因融合于植物表达载体， 如组成型启动子（maize polyubiqutin - like promoter)、embryo - preferred 启动子 (maize globulin 1 )和 endosperm - preferred 启动子（maize 22k^, alpha - zein)。其 中，用含embryo - preferred启动子的表达栽体可获得最高的表达水平，产最约达 种子总可溶性蛋白的4%。从80g玉米粉中可提取4.3mg带甜味的f(组Brazzein。 美国Nek丨ai■公司利用转基因玉米生产Brazzein,估计从U玉米中可提取1kg甜蛋 白，国内也有转Brazzein基因瓜果的研究报道。
为生产分泌嗦吗甜，构建了四个表达质粒pBKThb、pCKThb、pGDTh、 pGPThh (图5-6)。所有质粒均含有信号序列和编码的B2酯酶氨
(五）棉轩糖水解法
一般成年人的味莆数约有9000个，而婴儿的味蕾 数可能要超过1万个。人的味受体即位于舌表面 味莆尖端的小孔道内，由手指形的微绒毛 (O^ji.mxZOpLm)组成D味细胞的其余表面全为 扁平而不与外界通透的沟状细胞包裹，故受体的 微绒毛只有通过味莆尖端小孔道才能与口中唾液 接触。因此味刺激分子必须具有一定的水溶性，才能随唾液流入味莆孔穴中，吸附于受体膜表面 上而产生味感。
Jin等人为了进一步探求Brazzein的结构-功能关系，在猴子和人体身上进行 了试验。以des-pGlu Brazzein、25 Brazzein突变体和英奈林作为刺激物，将所有这 些蛋白质都溶解至浓度为HXVg/mL的溶液，调节pH至7.0。在猴子试验中， Jin等人通过观察个别的S味觉纤维来记录猴子对上述几种甜味剂的甜味刺激反应。 S纤维的选择标准是它们对甜味刺激的敏感度^在人体试验中，受试人对甜味刺激 物的甜度进行评分，接者把人体试验结果与猴试验电生理学结果进行分析对比。
肽却没有一个可以引发甜味。未能成功生产与可能的甜味指相符的小分子肽，这 一事实否定了甜味指假说的可能性。另外一个否定这一假说的证据是，影响莫奈 林甜味的突变体是分散在一个大的K域的，而非集中在一个长突出结构系统。在 Brazzdn实验中，也可观察到同样的结果。那么，目前惟一可以解释甜味蛋白与 甜味受体相互作用的机理就只有“楔形模型” 了。
