宣恩县甜菊糖
在嗦吗甜I、A、B基因的y端，加上3-磷酸甘油活化酶（PGK)启动子， 在3'端加上PGK终止子作为转录终点和多聚腺苻酸信号。将嗦吗甜基因试剂盒， 克隆至及co/i-酵母间的运送载体，质粒pJDB209。由于嗦吗甜基因在￡：.?>/〖和 酵母中都能复制，因此既能在中对基闽进行操纵，又能在酵母中对基闪进 行功能测试。但质粒PJDB209含有一个leu2 - d标记，使办-异丙基苹果酸酯脱 氢酶在酵母中的表达水平较低^将带嗦吗甜基因的质粒转移至突变株中， 这样由于约每200个酵母细胞完成一个突变，因此嗦吗甜基因试剂盒利用 率也提髙了约200倍，基因表达水平也相应提高。
莫奈林基因已在一些微生物和植物中进行了表达，表5 - 13列出了其中一些 研究结果。
货架寿命；在中性介质中或瞬时髙温杀菌条件下，纽甜的稳定性大大超过阿斯 巴甜，因此可作为焙烤食品的甜味剂。纽甜还可与还原糖及醛基风味物质共 同使用而不会发生不良反应，它的安全性也比阿斯巴甜有了较大的提髙。由 于纽甜的甜度高，等甜度成本要比阿斯巴甜低。W此，纽甜具有巨大的市场 潜力。表2-21 阿斯巴甜和纽甜的比较续表注：? MRS 10% ：达到与丨0%戾糖涫液相等鉗度所要求的溶解度的倍教
(-)从甜菊叶子中提取甜菊双糖A苷在过去的10多年中，人们作了很大的努力企图从甜菊叶子中提取双糖A苷 进行商业化生产。已知提取T.艺中用来分离甜物质的是髙度极性溶剂——水，这 是因为甜菊苷仅微溶于水而双糖苷A在水中的溶解度很大。通过浓缩去掉水， 然后再用甲醇提取即可优化先分离出双糖苷A产品，但其中还含有部分甜菊苷。 去除甲醇后通过二氧化硅胶柱采用丙醉-水-乙基乙酸盐溶液作流动相进行色谱 分离，再在戊醇水溶液中通过重结晶方法即可得到纯净的甜菊双糖苷A。通过这 种方法，可从叶子中提取出0.25%的结晶双糖苷A。而不经色谱分离则可从干
根据Slootstra等人对嗦吗甜的研究结果推测该位点对仙茅蛋白的甜味起决定 作用，但这两个氨基酸构沏与阿斯巴甜在溶液中L-型不同，而且，GNA也有一 个类阿斯巴甜位点ASP35 - Phe21,但并不具有甜味。
1969年，由于甜蜜素可能的致癌作用，导致美同国家科学院研究委员会否 决了甜蜜素的公认安全物质的地位。这一决定的依据是一家位于纽约的Maspeth 食品医药研究室的某些实验结果。该研究室的实验原料不是单一的甜蜜素，而是 甜蜜素与糖精的混合物。但是，后来其他人重复这个实验时，并没得出与之相同 的结果。
{二）不同位罝取代基对甜度的影响
在一些甜味蛋白中，广泛的表面区域呈碱性对引起甜味起莆要作用，因此, NBS的这些碱性氨基酸群有可能对Neoculin的甜味和味道修饰作用也起着重要作 用。这些碱性氨基酸群含有两个pA为6.0的组氨酸残基。由于Neoculin在中性 pH条件下仅引起轻微的甜味，而在酸性条件下引起强烈的甜味，因此这些组氨 酸残基可能是Neoculin甜味和味道修饰作用产生的必要条件。
添加有机助溶剂只增加了 P&,而如果能在P&增加同时减小P&,平衡得 率会增加更多。由Klibanov等人开发的水/有机溶剂二相体系可以实现这一点。 二相中有机相为水不溶性或在水中溶解度很小的有机溶剂，另-相为含酶的水 相。在水溶液中，羧酸和胺大部分以离子形态存在。在这二相体系中，假定溶解 在有机相中的都是非离子形态，且R,、K2没冇可电离的基团，则羧酸和胺的二 相电离平衡常数和可用下式计算：
大约与此同时，意大利的研究者描述了对阿斯巴甜蛋氨酸二肽化合物构象优 先性的研究结果，认为丨^口^是其优先存在的构象。Lelj等人依据阿斯巴甜的 FiDn构象优先性，提出一个具有普遍意义的甜受体结合模型，这其中有改进的 地方是将AH-B部分翻转了 180%这个模型能合理解释阿斯巴甜的D，D和L， D非对映体为何具有苦味。在任何情况下，每一种甜味化合物都能从Shallenberger 阻碍层的对面去接近甜受体，假定这个阻碍层是完全打开的。
