安龙县甜蜜素
第三节阿力甜
当用固定化酶在非水溶性有机溶剂中催化反应，需对多个反应参数如合成速 度、平衡得率和固定化酶的稳定性等进行综合考虑，并进行反应条件的优化。尽 管该系统中反应是在多孔载体内部的水相中进行，但水相的pH、底物、产物浓 度都难以测得。因此，只有通过分析在水/有机溶剂二相体系中游离酶催化的反 应来模拟在有机溶剂中用固定化酶催化的反应。
0.3g/L0以重组酵母GS115/PPIC9M/PPIC3.5kV为出发菌株，通过摇瓶水平发酵 条件优化，高甜度莫奈林的分泌表达量进一步由0.3g/L提髙到了 0.5g/L。在 30L发酵罐上采取分批补料的方式实现了重组酵母GS115/pP丨C9M/PPIC3. 5kV的 高密度发酵，高甜度萸奈林分泌表达量达2g/L。而且表达的髙甜度萸奈林分泌 到胞外，无需破碎细胞提取。诙方法提供了一条产量高、分离纯化简便、可低成 本大规模生产高甜度英奈林的新途径，为实现髙甜度莫奈林的产业化和vgb基因 在毕赤酵母髙密度发酵中的广泛应用萸定了基础。
尽管此法增加了一步反应，但却大大减轻了分离操作的压力，在工艺上和经 济上都是可行的，因此本研究采用这种方法对S -6 - a的氣化产物进行分离提 纯。当这种方法和S-6-a的分离提纯操作联合使用时，可以大大改善单基团保 护法的效果，显著提高三氣蔗糖的纯度和得率。
表2 -47 L-冬氨酜-D-丙氨醉酯及-D -丝氨酵酯化合物的结构与甜表2 -48对Searie公司的D -丙氨酸丙酯和两种相关的Ariyoshi化合物作了 比较，它们的“下面”基团大小相似。往D-丙氨酸酯中引入次甲基会使甜度 下降为原来的1/10，但在引入次甲基的同时反转酯基团的构象，则甜度仅下降 50%。这可能是由于构象的变化而引起甜度差异。
如前所述，纽甜的平均和90%的每日消耗量是用纽甜来取代所有产品中的 阿斯巴甜来预测的，在美国这些预测值分别是0.04和0. lmg/(kg*d)，这是个 非常保守的假定。然而，在实际上用纽甜来取代所有的阿斯巴甜是不太可能的， 而许多的其他甜味剂的使用会更进一步降低纽甜的用量。因此，预测的纽甜消耗 量远低于美国FDA所制定的可接受的每日摄人量，纽甜的实际消耗量也将会少 于市场前期的估计。
L -天冬氨酰-D-丙氨醇及-D-丝氨醉酯化合物[57] ~ [65]具有较 强的甜味（表2-47)。与前面所述的一样，随R基闭碳数的增加，化合物的甜
这意味着曲线没有平稳区域。因此，有序不可逆历程（图1-26机理3) 似乎最能解释心物学研究得到的各种数据。主观强度（汾）与浓度关系曲线具有 伸长的最大强度平稳区域（图1-27)，它证实上面提出的这个结论的正确性， 这条曲线与机理2有些出入。
