浮梁县木糖醇
[165]和[166]。反式化合物[丨65]是苦的，这与C02Me基团的化合物 [164]相一致。然而顺式化合物[丨66]中的一个非对映体有甜味，是蔗糖的 100?200倍。King等人总结认为，芳香环必须以顺式方式连接于肽键上才能得 到有甜味的化合物。相比较而言，与之有关的顺式脱氢阿斯巴甜图2-80 二肽化合物[3]及[163] ~ [167]的化学结构冬氨酰-顺式-脱氢苯丙氨酸甲酯）不具甜味。[丨66]与[167]两者间的这种 差异，是由于构象上的微妙差异和电子效应的不同引起的。
(三）通过水解实现各种甜菊双糖苷之间的相互转化加碱皂化甜菊苷和甜菊双糖E苷可生成相同的甜菊醇糖苷，这过程通过添 加10%Na()H或KOH水溶液，经过lh的回流反应即可完成。通过使用含有 KOH的甲醉-水溶液，可提髙甜菊醇糖苷的得率。
以核糖体蛋白质L41基因为标记，将用32P标记的含C. makosa的RIM - C基 因的Xbal -Sau3AI片段与Candida utUis ATCC9950的基因组DNA进行DNA杂交 分析，结果表明存在一个与KIM - C基因同源的基因。对Candida ut'dis ATCC9950的DNA用Sau3AI进行部分切割后的片段（5~10kb)转人经BamHI 酶切的质粒PBR322构建基因组DNA文库，用RIM - C基W探针对约30 000个 克隆子进行筛选，筛选得到5个正（positive)克隆子，对其中3个质粒构建了 限制性酶切谱图（图5-11)。该同源基W在质粒DNA上的大致位置通过对质粒 的限制性酶切片段进行DNA杂交分析得到。将能与探针杂交的4kb EcoRI片段 双向亚克隆至质粒pBluescript II SK进行DNA序列分析，现已测定广含L41基因 的2086hP的BamHI - SacI片段的DNA序列（图5 - 12),其排序策略如图5-11 所示。
甜的结合物[丨38],有4个结合位置 Shallenberger - Acree - Kier的AH - B -
组成蔗糖的两个单元——葡萄糖和果糖，当它们被转化成甲基- a - D -吡 喃葡萄糖讦或海藻糖和甲基-D -吡喃果糖苷时，形成的化合物甜度分别只 有蔗糖的丨/丨0和零，这说明甜味化合物要求生甜团三角形呈-种特殊的排列组 合。处于结晶状态和溶液状态的蔗糖，其a-丨）-吡喃葡萄糖基单元的构象楚椅 式（4C,)，而其沒-D-呋喃果糖基单元的构象是船式（3T4);呋喃环在它的右 角处连接于吡喃环平面上，娃通过两个分子内氢键0-6'连接于0-5和厂连 接于0-2而实现的（见图3-38，未加“”’符号和加了 符号的数字分别表 示葡萄糖甚和果糖基单元上的碳原子和被犇近的氣原子）。
+NH2S0,Na ?QH.jNHSOjNa + NH3 t
甜蜜素（Cyclama丨e)姮美国伊利诺伊大学的研究生Michael Sveda于1937年 偶然发现的，并于1945年申请到美国专利2275125。后来，位于伊利诺伊州北 部的芝加哥Abbott实验宰进行了必要的安全毒理学分析，美国食品与药物哲理 局于1949年批准甜蜜素钠盐为公认的安全物质后，投放于市场。几年之后，又 出现了甜蜜素钙盐。
目前用基W工程生产嗦吗甜的研究很活跃，表5 - 6所示为其中一些研究结 果。许多研究从学术意义上说非常成功，但产率还无法与从植物提取的相竞争。 嗦吗甜在微生物中的表达水平需达到lg/L,其成本才能与天然提取的相当，目 前还没有一种重组嗦吗甜达到这个表达水平。
