偃师市甜菊糖苷
植物嗦吗甜，经过SP-Sephadex离子交换层析及酸性屎素凝胶电泳后，完 全分离。提纯得到的两种主要的蛋白质，由TPCK修饰的羧甲基胰蛋白酶降解为 肽段（TPCK降低了胰凝乳蛋白酶活性），再经Cl8柱逆向HPLC分离，收集洗脱 液并测定氨基酸组成及序列后，根据已知嗦吗甜的一级结构（依据相似性）迸 行排序。比较后发现，这两种嗦吗甜中只有在46位上的氨基酸不同（分别为天 冬酰胺和赖氨酸），但它们均与已报道的嗦吗甜I和n序列不同，新序列分别用 嗦吗甜A、B表示。嗦吗甜A有1个或4个、嗦吗甜B有2个或3个氨基酸与嗦 吗甜I或II不同（表5-7)。
本反应是要使剩余的3个羟基全部氣化，不存在控制反应限度问题。近年又 报道了多种反应条件缓和、产率较髙、选择性良好的氣化试剂，如氣化氣亚甲基 二甲胺[(CH3)2N?=CHCl]Cle、四氣化碳与三苯基膦、磺酰氣、二氣正膦（如 三芳基二氣正膦、三芳氧基二氣化膦）、氧化三苯基膦与氣化亚砜。
选用正交表U (34)安排试验，试验方案如表3-7所示。试验结果表明， 最佳反应条件为：S-6-a: Vilsmeier 试剂=丨：7 (mol/mol)； S-6-a 浓度 15%; 反应温度1201;反应时间2.5h。在该条件下进行反应，摩尔产率可达35.6%， 说明控制适当的反应条件，可提高三氣蔗糖含摄，降低其他衍生物含摄。
以质量计，相对于2%蔗糖溶液，纽甜的甜度约为丨_倍（以摩尔数计约 为11000倍）；相对于5%蔗糖溶液，纽甜的甜度约为9000倍（以摩尔数计约为 丨_倍）；相对于10%蔗糖溶液，纽甜的甜度约为_倍（以摩尔数计约为 6600倍）。如图2-46所示，以质萤计相对于蔗糖的甜度，纽甜的甜度为1_ 倍，意味着lkg的纽甜相当于l_kg (10t)蔗糖的甜度。从图2-46还发现， 纽甜的相对甜度随浓度的变化而变化。阿斯巴甜的甜度以质貴计为蔗糖的180? 200倍，纽甜的甜度以质萤计为阿斯巴甜的30?60倍。因此，纽甜比任何?种 目前已商品化的甜味剂都要甜很多。
在双酶-化学联合法中，最值得关注的是优化G-6-a的发酵条件，以及 改善糖和糖酯的分离技术，这将有助于提高该法的效率。因此，脔要对G-6-a 形成过程中的生物化学和生理学机制，进行详细的研究以简化该操作。而快速分 析、良好的反应控制以及适时地终止反应，也是本方法所必需的。如能以蔗糖为 原料经微生物发酵作用直接生成S-6-a，这方法当然非常吸引人，在这方面值 得花大力气加以研究。
出邻亚磺酸苯甲酸屮酯，约lh后用H 酸测试反应终点应褪色。然后加人甲 苯，通氣气氧化，以2%联苯胺乙醉溶 液测试显深墨绿色为终点，静罝分层， 有机层为邻甲酸中酯苯磺酰氣平苯溶 液（简称磺酰氣）。依次将磺酰氣和水 加人胺化锅，在丨0尤时加氨水胺化， 温度可达70T，PH9以上，静置后取 下层铵盐液为邻甲酰苯磺酰亚胺铵溶 液（简称胺化液）。将胺化液放入酸碱 化锅内，加人甲苯和30%的盐酸到pH 为1，酸析后降温至20T.，取甲苯层 水洗去氣化铵得不溶性糖精甲苯溶液。 将此溶液加热，加入碳酸氢钠中和， 调PH至3.8 -4.0,静置后取水层， 加活性炭脱色、过滤，调滤液pH至 7，在70 ~ 75弋减压.浓缩，趁热过滤， 滤液经结晶、干燥得糖精钠。
干燥状态下的糖精贮藏数年后未发现任何分解现象。De Gartno等人发现糖 精水溶液在pH3. 3 ~8.0范围内、150T温度下维持lh没发现任何变化，用先进 的髙压液相色谱分析技术已证实了这个结果。只有经髙温、高压和低pH等极端
三、色氨酸衍生物
选择以滴入的方式往环化剂溶液中添加三氧化硫溶液；三氧化硫为氨蓰磺酸物 质的量的5倍，环化反应温度控制在-25?30%之间，环化时间选用0.5h;水解反应 温度为-丨5尤，水解时间为丨.5h。选用上述优化条件，安赛蜜收率可达81.6%。
本研究选用乙酸酐和蔗糖在吡啶溶液中低温下进行单酯化反应，以实现对蔗 糖C-6位羟基的单基团保护。研究发现，当蔗糖用最小世的吡啶（蔗糖：口比
