上林县糖精钠
日本DaiichiSeiyaku有限公司曾做过研究。此法路线短，原料易得，但产物 复杂，反应时间长，产率较低。
图5-26 Neoculin的带状图 (1) NeooJin异型二聚体的总体结构（每一个亚基中的/3 -链由B丨至B12择明，
由于甜味剂和甜味蛋白之间在大小上存在着巨大的差异，因此，研究人员认 为，甜味蛋白所作用的受体有别于低分子质量甜味剂的。尽管对活性位点的间接 研究早已表明了甜味蛋白受体存在的可能性，可事实上，这些受体一直到近几年 才得到确定和分析。
Morini等人推测的可以结合“A型部位”的四种化合物——糖楮、阿力甜、 阿斯巴甜和6 - Cl - D -色氨酸中，至少有3种可与其他甜味化合物发生增效作 用。这表明，在单一亚基上的结合足以使受体活化，而在第二个亚基上结合配体 则可以强化反应。关键的一点是只有在两种甜味剂都是小分子甜味剂或一个为大 分子甜味剂和另一个为小分子甜味剂的情况下，才能观察到增效作用。倘若两个 都是大的非蛋由甜味剂的情况下，那么就不能观察到增效作用。
关于糖精钠中钠离子的作用，目前还没弄清楚。有一份研究表明，糖精钠的 活性较其他形式的糖精来得大，此外，还发现摄人与糖精钠一样数量的糖精酸 后，并没有膀胱肿瘤病变发生。
(五）棉轩糖水解法
将50gTRISPA (0. 039mol)溶解在lOOmL 二氣丨t丨烷中，加入25mL乙酸， 降温至(TC后加人10mL浓盐酸，0T冰水浴、磁力搅拌下反应2h。加人处理过 的树脂于反应物中搅拌lh，过滤除去树脂后真空浓缩。200mL甲醇加人上述浓 缩浆液中，待完全溶解后降温至0T，磁力搅拌下反应3h。过滤出27. lg三苯基 甲醉沉淀物，滤液用活性炭脱色后真空浓缩，用乙醚结晶，得到19.8!?白色针状 物质，为2，3，4, 3、4'-五乙酸蔗糖酯（4-PAS)，得率为92%。
NH—S02 NH—S02
(二）甜菊苷向甜菊双糖A苷的转化1977年，日本田中等人成功地通过酶水解，将甜菊苷转化成另一种天然双 蔽苷Ru丨)usoside (我国华南地区截薇科植物Rubus suavissimus的叶子中含有这种 糖苷，参见本章第五节），然后再通过三个步骤即可转化成双糖A苷，产率为 75%。甜菊苷向甜菊双糖A苷转变的化学途径见图4-16。
至于MNEI，也已被合成且克降于带有T71ac启动子的pET -22b +的载体 中，并于大肠杆菌BL21 (DE3)中得到表达。最近，单链莫奈林基闪MNE丨已 在大肠杆菌偏爱密码子的基础上被设计出来，从而优化了基因在大肠杆菌中的表 达。这些合成莫奈林基因被克隆于含T7启动子的PET-22 b载体。SDS-PAGE 分析结果表明，重组莫奈林的产虽髙达总可溶性蛋白的45%。
