湖口县果糖
(四）致突变试验
④性质稳定，用途广泛。
天然Brazzein的氨基酸序列缺少端蛋氨酸（甲硫氨酸）[图5-24 (2)]， 因此合成基因[图5-24 (3)]的第一个密码子前引人起始密码子Met。野生型葡 萄球菌核酸酶中含有4个蛋氨酸，经CNBr解离产生的肽链会影响Brazzein的分离 纯化，因此用快速定点突变将核酸酶基因（SNase)的4个Met的密码子用Ala的 密码子替换。SNase的4个蛋氨酸转化为己氨酸（正亮氨酸）对核酸酶活性没有影 响，SNase中蛋氨酸突变为丙氨酸会降低核酸酶的稳定性。经修饰后融合蛋白中只 有一个的蛋氨酸间隔SNase和SW K [图5-25 (2)],所得的融合蛋白表达水平 高并且核酸酶具有活性。在如-pGlul - Brazzein合成基因的5'和3'端分别加上 Ndel和BamHI位点，这样就可以克隆至任一 pET质粒。通过对天然核酸酶-卵类 黏蛋白融合基因表达质粒进行改造构建新的质粒。将Brazzein合成基因（SW基 因）插人pET-3a表达系统SNase基因C-端的Ndel和BamHI位点之间，得到质 粒PET-3a/SNase-SW [图5-25 (1)]0融合蛋A转录和翻译信号由T7表达载 体PET-3a产生，蛋白质在lac启动子的控制下生产。
研究人员猜测，Neoculin特有的在B11和B12之间的C端环，可能在甜味产 生和味道修饰作用中起一定的作用。在连接/S-链的其他环中，Neoculin特有的 氨基酸序列主要位于四个环——L2-3、L4-5、1^-7和19-10中。尤其在 NBS中，位于12-3、L4-5和L6-7三个环的六个碱性残基于分子表面组成一 个大碱性区域，这一特征使得Neoculin表面的静电势分布明显有别于植物凝集素 中的。研究人员猜测，这个结构群有可能参与了 Neoculin的甜味产生和味道修饰 作用。
酵母生产的嗦吗甜并不全部分泌在培养基中，有很大一部分留在细胞内。胞 内嗦吗甜（thaumaternal)与成熟嗦吗甜的分子质量相同，这表明它通过内质网 进入了分泌途径，但未通过商尔基体和囊泡完成整个传输过程。胞内蛋白既无免 疫特征，也无甜味，约占总嗦吗甜的50%。
钠溶液，合并到有机相中。无水硫酸钠十燥，过滤，蒸馏得6-甲基-3，4-二
而两者间的复合强度决定了甜味刺激强度，即甜度。糖的AH、B系统为a-乙 二醇基团，部分典型甜味化合物中AH、B单元的分子识别如图丨-5所示。这 样，人类第一次拥有了一种简单的基础理论来解释各种甜味分子产生甜味的 原因。
大了它的应用范围。当阿斯巴甜与碳水化合物彻甜味剂（如蔗糖、果糖或葡 萄糖）混合时，产品能量下降不少而甜味却没有变化。当阿斯巴甜与强力甜 味剂（如糖精、甜蜜素、安赛蜜或甜菊糖）混合使用时，产品有时略带有苦 涩味，这可通过加大混合物中阿斯巴甜的比例来改善，改善程度随阿斯巴甜的 比例增大而增大。混合甜味剂协同增效作用与各组成甜味剂所占的比例及食品 配料系统有关。
