来凤县甜菊糖
深黄色的硫酸相。分出有机相，酸相用等体积的溶剂（S)萃取两次。合并有机
(-)蔗糖8个羟基团的完全保护
由于合成阿力甜二肽的氨基酸具有疏水性，在水中很难溶解，同时二肽反应 的过程中会产生水，因而此反应在水相中的效率较低。但若在有机相中反应，有 机相会改变酶的构象，致其变性，最终也将导致反应效率降低。而在低熔点混合 物中进行疏水氨基酸二肽合成反应，就能较好地解决这个问题。
表2-44给出的L-天冬氨酰-L-氨基醇衍生物，是通过对“上面”或 “下面”基团的羟基化实现的。它们没有表2-43所列化合物的酯基部分，因此 分子的稳定性得以提高。带有“下面”无环基团的[36]和[37]甜度适中， [37]结构中的S，S异构物在四种可能的非对映体中甜度最大[D/L通常用来 表示氨基酸和碳水化合物的绝对构型，其余化合物的构型则用R/S来表示。R/S 标注法通常是用?套顺序规律（sequencerules)对不对称碳原子的4个基团进行 分类，属于Cahn-Ingold-Prelog系统标注法]。带有环烷基或二环烷基取代基 的[38] ~ [41],其甜度要大得多。表2 -44 L-天冬氨酰-L-氨基酵化合物的结构与甜度
图1-丨3 D-氨基酸和L-氨基酸的构甩及其AH、B、X系统吡喃型和呋喃型糖分子环上的氧被亚甲基取代后的化合物称假糖 (Pseudosugar),如少-办-D -吡喃杲糖。这种假糖分子的构象与其相应的正常 糖分子相似，如必-/3-DL-吡喃葡萄糖（阁1 -14)。屮-a-DL-批喃半乳糖 和沙-卢-DL -吡喃果糖的甜度与它们母体糖的甜度相似。环上的氧对糖分子的 甜度没有多大影响。4甲棰吡喃糖苻、甲基呋喃糖苷和假糖的化学结构 (I)甲基-?-D-吡喃葡萄糖什 (2)甲基-彡-D-呋嘣果榭作 (3)屮-卢-D-吡蝻葡鈞铕 (4)甲基吡喃木溏作
第二节莫奈林
(1 )采用 土 chrysogenum 的 B2 培动子（2)采用 P. chrysogenum 的 pcbC 启动子 (3) /l.rjwamori 的 gdhA 肩动子（4) /!? n/rfuimM 的 gpdA 启动子
果素。首先，导入重组奇异果素基因，构建重组奇异果素的表达质粒，并在表达 质粒中插人KEX2切割位点；然后，将表达质粒导人如orrzoe，获得30 个产重组奇异果素的转化株。选择产量最高的菌株进行大规模培养，培养时间为 3d。Western印迹分析确定了培养基表面有重组奇异果岽的存在。结果还显示， 在非还原条件下，60ku处有一条宽带，301O1处仅有一条校糊的带；而在还原条 件下，60ku处的带消失，30ku处的带却变宽。这些结果与两个30ku单体在非还 原条件下形成60ku的二聚体的事实相符。重组奇异果素的产量估计为2mg/L培 养基，纯化重组奇异果素的产S娃0.8mg/L培养基，所得的单体重组奇异果素 和二聚体重组奇异果素的分子要比天然奇异果素的大。对N42、186Q突变体的 N端糖基化位点的分析结果清楚地表明，这是由于所得糖蛋白的糖链部分质里有 所不同而造成的。
在酒精中，安赛蜜的溶解度很小，20弋时在无水乙醇中溶解度仅为lg/L。 但是，在乙醇中加入少留:的水可大大提高安赛蜜溶解度，所以安赛蜜溶在醇-水 混合液中作调味品或口腔卫生产品，不会发生溶解度问题。在水-乙醇混合液 中，溶解度随着含水里的增加而增大，在50%乙醉液中达到100g/L (表6-4)。 安赛蜜的稀溶液几乎是中性的。
分离提纯过程，主要根据嗦吗甜的水不溶性及电荷特性进行。阁5-4所示 为从酵母中分离提纯嗦吗甜的流程图，得率达80%，纯度>95%。在该流程后， 还可以冉进行SDS凝胶电泳或在离子交换层析后，在lOOmmol/L醋酸中进行 SP-SphadexG-75凝胶过滤，去除少萤杂蛋白。提纯结果表明，转化酵母中的 嗦吗甜约占不溶性蛋白质的20% (或总蛋白质的10% )。
