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Sarroch Theemsilp等还根据分子组成计算了分子质苗:。奇异果素的氨基酸部 分的分子质量为21257u,糖组分约占13.9%,因此总分子质鱼为24600U (约 25ku),该值是由SDS - PAGE估测的分子质世28000u的88%。对于奇异果素分 子质量,若采用的测定方法或样品不同,结果也不同。在尚未得到纯样品时,根 据粗样品采用不同方法测得的奇异果素分子质迸均约是25ku的2倍。如用SDS -PAGE测定的未还原奇异果素的分子质谊为43kii,约是根据氨基酸组成及糖类 成分计算的分子质萤25ku的2倍。奇异果素的粗提物用0. 5mol/L NaCl从Sepha- dexG-75柱洗脱后,发现分子质世为52ku处的组分具有变味活性。在无DTT 的SDS-PAGE中,在431oi处有一条宽带,而奇异果素还原后,在28ku处有宽 带。天然奇异呆素用低角度激光散射(low angle laser light scattering)测定的分 子质量为90ku。这些结果表明天然粗奇异果素是25ku-肽的二聚体,纯奇异果 素娃该肽的四聚体,有可能杂质使得奇异果素二聚体难以聚合成为四聚体,并发 现奇异果素的纯四聚体和天然二聚体都有变味活性。
据分析,它的分子中的於-折奋与月-弯曲的数虽较多,分别为29%和 27%,其余均为自由挠曲。然而,这些仅是理论推测的结果,并非是直接测定的 精确数值。德国柏林的Max Planck学院的研究人员用计算机计算结果表明,嗦 吗甜分子中a -螺旋占10% ,芦-折蚕和/3 -弯曲的占70%,自由挠曲占20%。 显然这些数值与上面的推测相差甚大。
Prekash等利用催化剂还原/V-烷基化反应制备纽甜。将阿斯巴甜与
该氣化反应在较温和的条件(如701)下进行,能选择性地与蔗糖分子中 较活泼的伯位羟基6、6'反应,但研究表明,它还可使蔗糖五乙酸酯的r发生氣 代反应,理论得率为40%以上。该反应最好在叔胺介质中进行,特别是在诸如 吡啶之类的杂环叔胺。当三芳基膦中的1个芳基被交联聚苯乙烯的苯乙烯基团取 代成为三芳基膦结合树脂,反应完成后则容易将未反应物和副产物氧化膦过滤 去除。
1998年12月,关于批准纽甜作为食品甜味剂的申请向美国食品与药物管理 局(FDA)提交,并于2002年得到美国FDA批准,随后中国等世界很多国家也 已经批准使用。纽甜代表着当今强力甜味剂研究的最高成就,前景广阔。
转化菌株TB2bl -44中已含有B2作启动子的表达盒,再经质粒pG丨)71 (该 质粒含有gdhA启动子和潮霉素抗性基因作标记基因的表达盒)转化得到双转化 体(double transfonrnin丨),从中选择产率较高的双转化体TB2bl - 44 - GD4、 -GD5、-GD6、-GD7在MDFA优化培养基摇瓶培养后达到最高的表达水平
协同增效作用具有很大的应用价值,对研究味觉机理也很蜇要。由此可推断 认为两种甜味剂在甜受体上各有不同的作用部位,如两者彼此不影响,则各有各 的受体;如两者彼此削弱,则说明它们是竞争性占有相同的受体部位,当然削弱 作用还可能有其他非竞争性抑制因素。
纽甜在结构上类似于阿斯巴甜,但是由于纽甜分子中含有3, 3-二甲基丁 基团,能够几乎完全阻断用来打断天冬氨酸和苯丙氨酸之间肽键的肽酶的作用, 从而减少了苯丙氨酸的形成。因此,纽甜对苯丙酮酸尿症的患者不需要作特殊的 商标注明。
阿斯巴甜在食品或饮料中的主要作用表现在以下五个方面:①提供甜味,口感类似蔗糖。②能量可降低95%左右③增强食品风味,延长味觉停留时间,对水果香型风味效果更佳。④避免营养素的稀释,保持食品的营养价值。⑤可与蔗糖及合成甜味剂一起混合使用。
图1-35甲基-a-D -吡喃甘餺糖苷对味觉受体的端基极化 {二)基本味的相互作用
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