长泰县低聚果糖
收。在为1kg体重提供丨g蛋白质的正餐中加人阿斯巴甜（34rng/kg剂量）的试 验发现，加与不加阿斯巴甜对血浆中天冬氨酸的浓度没有多大的影响。
(三）安赛蜜在食品中的稳定性
(四）酵母嗦吗甜的分析
图5 - 5 变性嗦吗甜体外折叠至天然构塑的操作流程
安赛蜜在水溶液中的稳定性取决于pH和温度，在食品和饮料中的最佳pH 范闱3~7。在正常情况下安赛密溶液的浓度差超过5%时，就能尝出甜味的差 异。如发觉甜味有差别时，就可预计到5%的浓度差已开始产生了。pH为3的 产品在室温储存几年后，其中的安赛密才有5%的损失，这已大大地超过规定的 储存期，随着pH的升髙，货架期的稳定性也进一步改进。在PH7.5的缓冲液 中，室温中储存10年后，安赛蜜含萤仍为99%，这就证明存放10年的安赛蜜 含谊在统计上没有显著的损失。
七、利用棉籽糖水解法酶法生产三氯蔗糖
1.生甜团的分子识别早先在考虑Kier-Shallenbei?模型的尺寸范围和蔗糖的分子结构后，人们认 为蔗糖分子内有两种可能的三角形生甜团系统：即厂-OH (AH)、2-0 (B)、 4-H (X)和 3,-OH (AH)、2-0 (B)、4-H (X),它们均是以顺时针方向排列的。怛这种安排 只能证明丨? - OH/2 - 0和3# - 0H/2 - 0在充当蔗 糖生甜闭中AH、B基本单元上的正确性，却不能 说明为什么蔗糖C-l'、C-4'、C-6,位上的羟基 被氣原子取代后均能使甜度显著增加。
至于甜位罝上溶液构象与活性构象的关联问题，目前还不淸楚。若不考虑环 境W素，可维持形状的构象受限同型物有助于解决双定性问题。这里以前面讨论 的同型物[163]?[167]为例进行说明。2，3-二氢化茚基和反式取代的环 丙基同型物[163] ~ [165],带有近似F1构象的苯基和天冬氨酰残基，前者 [163]的甜度较低而后两种[164]与[165]没有甜味。顺式环丙基同型物
质粒pET-3a/SNase-SW转化至大肠杆菌BL21 (DE3) /pLysS菌株进行表 达。采用pLysS菌株可以消除引人前核酸酶的不利影响，更有利于核酸酶- Brazzein融合蛋白的表达。转换后在37T加人100|xg/mL阿司匹林、34jjig/mL氣 霉素的Luria培养基（LB)中培养一段时间后，加人IPTG后培养2~3h，大肠 杆菌中分子质萤23ku的融合蛋白产量达到最大，多数在内含体沉积，在16%的 Tricine凝胶中50%?70%的融合蛋白不溶。内含体蛋白经电泳凝胶提纯后，大 部分融合蛋白重新折黉(refolded),提纯纯度> 80%。经CNBi?处理后， 50%?70%融合蛋白发生解离，这说明融合蛋「丨不能完全解离。因Brazzein酸性 较强，p/约5.4，而核酸酶碱性较强，p/9.4，因此融合蛋白解离后用阳离子交 换色谱即能分离产物。纯化得到的重组Brazzein具有较高纯度及正确的分子质量 (6.4ku)0解离后得到的肽链与^-pGlul -Brazzein序列相同，甜度是植物提 取Brazzein的2倍，与从植物中分离得到的如-pGlul - Brazzein甜度相当。已 研究表明蛋白质只有在折垒正确时才具有甜味，未折垒(unfolded)或折奋错误
