乌兰浩特市爱德万甜
酸、50mL溶剂（S)加人干燥的250mL三口反应瓶中，开始搅拌。在15?20T
在莫奈林蛋白质分子中，以a-螺旋结构形式存在的比例较小，以於-折奋 构象存在的比例则较大。如图5-10所示的三级结构中，A链与B链可看作是两 个不同的区域，A链含有1个螺旋结构和丨个於-折叠结构，而B链包含3 个泠-折叠结构和丨个/3-螺旋结构。
Kondo等人曾尝试构建一 SCM质粒并在C— idilis中生产SCM。他们把 SCM基因插入由产脘假丝酵母(C. utUis)克隆来的GAP基因的启动子和终止子 片段之间。通过这种方式，他们获得了高产虽的SCM，表达水平高于总可溶性 蛋白的50%。他们还尝试克降带S. cerevisiae GAPDH启动子的SCM基因用来生 产SCM。然而，所得的产最水平很低，仅为总可溶性蛋白的5%左右。美国一专 利公开了利用P. pastoris生产SCM的方法。首先将合成的SCM基因克隆于含有 S. cerevisiae a -因子分泌信号和GAPDH启动子的PGAPZa -载体，然后将构建的 质粒转化成P.P^tori5GS115，最后通过菌株对Zcocin的阻抗性，对转化株进行 筛选。观察发现所分泌的.1：组英奈林为一条12kji的带。SDS - PAGE分析表明， 通过该方法可获得约10g/L的SCM。这些SCM经纯化后可引起甜味。
二肽系列化合物的结构与甜小的R,基团更合适。有趣的是，在手性中心含两个甲基的同型物[7]仍具有明 显的甜味，这表明“前-L” (Pm-L)型甲基的重要影响并未被第二个甲基所 消除。在氮原子上的甲基取代或使甲基移至碳原子上将导致甜味的丧失。R2 基团经常"了以变化，如用呋喃基[10]和环己基[11]来取代，也可用碳原子 数在5个以内的简单无环烷基来取代（[12]-[丨4])。
由于酵母宿主中内源有对CYH敏感的L41基因，因此细胞中需有多个该标 记基因（3 ~ 10拷贝/细胞）以选择CYH抗性转化体。为增加每细胞中整合载体 的数目，通过从5#端缺失CYH抗性基因的启动子区域构建启动子缺失的CYH抗 性基因的质粒[图5-13 (1)]。该质粒在rDNA片段处线性化后转化至 尽管在亲代质粒PCLRE2 (图5-14)和pCLREll间没有显著的转化率差别，但 进一步的缺失会降低转化率。pCLRE15和pCLRE16的转化率约是pCLRE2的 15%，pCLRE17约是pCLRE2的0. 3%，PCLRFJ8则没有产生转化体。以丨41基 W在每细胞中的拷贝数为2计，经估计拷贝数最多的PCLRFJ7的拷贝数达到每
另外的结合部位
综合上述分析，天冬氨酰残基在水溶液中优先存在的构象是Dn，这点在众 多研究中结论是一致的。对于C-端氨基酸残基来说，有4 ~5个研究认为它在 阿斯巴甜或其蛋氨酸同型物中优先存在的构象是Fd。因此，甜二肽的优先构象 就是FdDu。但Goodman等人分析却认为应该是F,Dd构象。虽然对优先存在的 构象没有一致的看法，但对由于苯基及天冬氨酰基偏转（Fb*Fb)引起的弯曲 构象的看法相一致。
第一节甜菊苷
②在此基础上，通过合成B链的Glul -Pn?20和Cyc21 -Gly41片段，获得 大B链片段——Glul - Gly41 ；
