龙岗区木糖
也有微弱的甜味，而具有较大基团的6 - 0 -苯甲酰酯和6 -磷酸酯蔗糖衍生物 则没有甜味。此外，4f-羟基的移去并不损害甜味，而增加C-4’取代基的尺寸 和疏水性如从H (脱氧，150倍，以蔗糖为比较基准，下同）到0-CH, (300 倍〉，再从F、Cl、Br到I也导致甜味的显著增加。因此，C-6位及C-4涖上 的羟基不可能成为三氣庶糖的AH、B部位，而只可能是三氣蔗糖葡糖基上剩余 的平伏C-2位羟基和C-3羟基以及果糖基上的C -3’羟基有这种可能。
五、利用固定化酶法合成阿斯巴甜
N-3，3-二甲基丁基（DMB)取代型二 肽甜味剂，如纽甜[图2-90 (1)]及其《-甲 基苯基丙氨酸类似物[图2-90 (2)]，前者甜 味为蔗糖7000倍，后者略低。经X-射线和 NMR分析及分子模型测定，它们在水溶液中的 每一种构象均呈现出L-型或延展型，并且，除 了反向L-型以外，其他的DMB基团正好处于 前面所说D冈域。在另一种纽甜类似物[图
该氣化反应在较温和的条件（如701)下进行，能选择性地与蔗糖分子中 较活泼的伯位羟基6、6'反应，但研究表明，它还可使蔗糖五乙酸酯的r发生氣 代反应，理论得率为40%以上。该反应最好在叔胺介质中进行，特别是在诸如 吡啶之类的杂环叔胺。当三芳基膦中的1个芳基被交联聚苯乙烯的苯乙烯基团取 代成为三芳基膦结合树脂，反应完成后则容易将未反应物和副产物氧化膦过滤 去除。
质粒pET-3a/SNase-SW转化至大肠杆菌BL21 (DE3) /pLysS菌株进行表 达。采用pLysS菌株可以消除引人前核酸酶的不利影响，更有利于核酸酶- Brazzein融合蛋白的表达。转换后在37T加人100|xg/mL阿司匹林、34jjig/mL氣 霉素的Luria培养基（LB)中培养一段时间后，加人IPTG后培养2~3h，大肠 杆菌中分子质萤23ku的融合蛋白产量达到最大，多数在内含体沉积，在16%的 Tricine凝胶中50%?70%的融合蛋白不溶。内含体蛋白经电泳凝胶提纯后，大 部分融合蛋白重新折黉(refolded),提纯纯度> 80%。经CNBi?处理后， 50%?70%融合蛋白发生解离，这说明融合蛋「丨不能完全解离。因Brazzein酸性 较强，p/约5.4，而核酸酶碱性较强，p/9.4，因此融合蛋白解离后用阳离子交 换色谱即能分离产物。纯化得到的重组Brazzein具有较高纯度及正确的分子质量 (6.4ku)0解离后得到的肽链与^-pGlul -Brazzein序列相同，甜度是植物提 取Brazzein的2倍，与从植物中分离得到的如-pGlul - Brazzein甜度相当。已 研究表明蛋白质只有在折垒正确时才具有甜味，未折垒(unfolded)或折奋错误
现在对蔗糖衍生化的兴趣已集中在脱氧-卤化上，这不仅因为它是合成稀少 的、在生物学上具有重要作用的脱氣糖和氨基-脱氧糖的中间物，而且还可用在 生化和医药工业上。现已有碳水化合物肉化衍生物生产，用来作为抗菌素，它具 有更好的抗菌特性和良好的化学治疗功能。
由于甜受体是由一定顺序的氨基酸组成的蛋白质，因此有较严格的空间专一 性要求，极性强、带刚性骨架部位要求尤为严格，而极性弱、带挠性骨架部位则 有一定的伸缩余地。
制备三氣蔗糖的核心在于对活泼的C - 6位羟基进行保护，使之不被氣化。 所谓单基闭保护法，就是只对蔗糖分子8个游离羟基中的C-6位羟基进行专一 保护，然后直接进行选择性氛化。该方法可以使反应过程大幅度简化，但一般需 要髙效的色谱分离操作。
Brazzein通常与其他种类的甜味剂复配来改善饮料的口感。这种方法在柠檬 酸饮料和磷酸盐饮料中均有很好的效果。在适当的比例下，Brazzdn可与大多数 高效甜味剂复配成很好的甜味剂。分别或同时与安赛蜜和阿斯巴甜复配时， Brazzein还能提髙产品的稳定性、风味和口感。Brazzein可明显地消除其他甜味 剂甜味不纯的影响。例如，甜菊苷和Brazzem复配后，其甜味质量要比单独使用 甜菊苷好。
