云南阿拉伯糖
和蔗糖与糖精相比，二氢查耳酮的甜味来得太慢，消失得也慢，后味绵长， 有时带有类似甘草甜素和薄荷醇之类的苦后味，因此，它的甜味特性不太好。改 进的办法有两种：一种是对其分子结构进行改性；另一种方法是添加些味觉改良 剂或填充剂。据研究，改性分子丝氨酸，二氢查耳酮的甜味持续时间明显缩短， 而甜度基本不变[为蔗糖的（400 ±30)倍]。添加些办-葡萄糖酸内酯、氨基 酸和核苷酸也能缩短二氢查耳酮的甜味持续时间，提高其甜味质量。
四、利用全基团保护法生产三氯蔗糖
以2# (kg-d)浓度水平喂养怀孕小鼠6~15d，发现嗦吗甜没有致畸性。活 体外微生物基因诱变试验表明它没荷诱变活性。因为嗦吗甜是可溶性蛋白，有人W 此推测它在肠道内可能具有免疫活性，但经口试验没检测到它的任何免疫活性。
丨氨酸（甜度为蔗糖的35倍）转变成6-氣代衍生物，其甜度增加了 30 倍，为蔗糖的1000倍。这说明研究蔗糖的氣化衍生物也是可取的。然而，糖楮 (甜度为蔗糖的500?700倍）的氯化衍生物其甜度只有蔗糖的100 -350倍，氣 化处理并没有提髙该分子的甜度。
蔗糖浓度/%
(-)高甜度二肽同型物Searle公司最早的文献发表一年内，所发现的全部二肽甜味剂，其甜度均小 于阿斯巴甜甜度的两倍。最先发现的髙效二肽甜味剂，是L-天冬氨酰-D，L- 氨基丙二酸二酯。表2-49所示为反映“下面”酯基团重要结构特征的例子。 经适度取代的刚性基团（Rigidgroup)可得到最大的甜度，例如[70]环己基在 C-2位上的甲基化[71]能使化合物甜度大为增强，但在C-3或C-4位上的 取代[72]和[73]，并没有这种效果，这显然是由于受体在立体空间中不能很 好地接受这些位置上的取代基。刚性二环葑基酯中与酯氧原子的/? _原子经充分 取代所得化合物[74]，其甜度很大。系统比较四种可能的葑醉衍生物[74] ~ [77],可知它们的甜度范围高达1000 ~5_倍。
质粒pET-3a/SNase-SW转化至大肠杆菌BL21 (DE3) /pLysS菌株进行表 达。采用pLysS菌株可以消除引人前核酸酶的不利影响，更有利于核酸酶- Brazzein融合蛋白的表达。转换后在37T加人100|xg/mL阿司匹林、34jjig/mL氣 霉素的Luria培养基（LB)中培养一段时间后，加人IPTG后培养2~3h，大肠 杆菌中分子质萤23ku的融合蛋白产量达到最大，多数在内含体沉积，在16%的 Tricine凝胶中50%?70%的融合蛋白不溶。内含体蛋白经电泳凝胶提纯后，大 部分融合蛋白重新折黉(refolded),提纯纯度> 80%。经CNBi?处理后， 50%?70%融合蛋白发生解离，这说明融合蛋「丨不能完全解离。因Brazzein酸性 较强，p/约5.4，而核酸酶碱性较强，p/9.4，因此融合蛋白解离后用阳离子交 换色谱即能分离产物。纯化得到的重组Brazzein具有较高纯度及正确的分子质量 (6.4ku)0解离后得到的肽链与^-pGlul -Brazzein序列相同，甜度是植物提 取Brazzein的2倍，与从植物中分离得到的如-pGlul - Brazzein甜度相当。已 研究表明蛋白质只有在折垒正确时才具有甜味，未折垒(unfolded)或折奋错误
而两者间的复合强度决定了甜味刺激强度，即甜度。糖的AH、B系统为a-乙 二醇基团，部分典型甜味化合物中AH、B单元的分子识别如图丨-5所示。这 样，人类第一次拥有了一种简单的基础理论来解释各种甜味分子产生甜味的 原因。
