要批准和使用一种新的人工甜味剂，毒性鉴定是极其重要的。人们已对安赛蜜进行了一系列严格的毒理试验，结果表明它是一种安全无毒的高效甜味剂。
安赛蜜的急性口服毒性是很低的，可以认为没有这方面毒性。按6.9~8.0g/kg体重标准进行口服试验测得半数致死量LDso为2.2g/kg体重；人们用含安赛蜜0%~10%浓度的饲料饲养白鼠90d进行亚慢性毒理试验，用含安赛蜜0%~3%浓度的饲料喂养白鼠进行潜在致癌性和慢性毒理试验，用含0%~3%安赛蜜饲料喂养白鼠进行致癌性试验。此外还用它喂养狗2年进行安赛蜜的慢性毒理试验。所有这些试验结果均表明安赛蜜是安全无毒的。
在Ames试验中（沙门氏试验菌种为TA98、TA100、TA1535、TA1538）和哺乳动物细胞（中国仓鼠）的试验中，都未发现有遗传畸变现象。观察中国仓鼠染色体的畸变或用45~4500mg/kg体重的剂量对小鼠的细胞核进行试验，都未见到畸变现象。另外小鼠的纤维细胞研究，也没有发现恶性变化，也不与DNA结合，对肝、胆也不产生不良影响。这些遗传学毒理试验均表明，安赛蜜对遗传不产生毒性作用。
在各种致突变试验研究中，包括强致死试验、微核试验（micronucleuslest）、骨髓试验、恶性转移试验、DNA结合试验等，均未发现安赛蜜有任何致变现象。用白鼠进行繁殖试验，表明安赛蜜对试验动物的生育能力、每窝小动物总数、动物体重、生长情况和死亡率等均没任何影响。
