颍上县索马甜
(1)表达盒构建简ffl (2)单链典佘林DNA序列和《联酸序列 注：天然货奈林的A、B链经甘氨酸连接，围中该甘氨酸用下划线标出,
1975 ~ 1978年间，明石和光桥发表了数篇论文报道了这方面的研究情况。 他们以2.5g/kg剂最的甜菊苷喂养小鼠1个月，以5g/kg剂量的较纯提取物（含 甜菊苷40% -55%)喂养小鼠5个月，均没发现任何毒性反应。
阁4-5环糊精葡糖基转移酶转化糖箪化产物的化学结构
图1 - 32 Brazzein和嗦吗甜与受体活性形态——Aoc - AB的对接的比较 (1)通过对接计算而得的两个Aoc - AB和15个Braacin分子结合的观察阳 (淡绿色部分为T1R2,深绿色郎分为T1R3, 部分为Braoein分子）
带有芳香基团取代基的二肽甜味剂如图2-92 所示，二甲基-甲氧基苯酚类似物[图2-92 (1)]的甜度约为蔗糖的5_倍，不带甲基后 [图2-92 (2)]甜度减半（25000倍）；二甲基苯 基类似物[图2-92 (3)]的甜度为蔗糖的4000 倍，而3 -苯基丙烷基类似物的甜度只有蔗糖的 1000 倍。
通过增加浓度进行品尝来测定三氯蔗糖的甜味阈值，敏感者的甜味阈值浓度 是0.00014%，较不敏感者为0.00113% ,平均值为0.00038%。而用蔗糖进行同 样品尝的结果表明，其阈值为0.07%和1.13%，平均值为0.31%。由此数值计 筲出三氯蔗糖的甜度，为蔗糖的815倍。
甘茶甜素（Phylloduldn)是用酶水解法由虎±1：草科（Saxifragaceae)植物八 仙花 Hydrangea macrophylla Seringe var. thundergii ( Siebold ) Makino 叶子天然存在 的糖苷中分离出来的，它在叶子中的含最高达2. 36%。围绕着Phyllodulcin的分 离纯化，已申请了数个专利方法。有一种方法是利用甲醇或乙醇提取，通过调节 1>H及用氣仿抽提法去除色素及Hydrangenol ( Phyllodulcin的非甜同型物）等杂 质，然后用一种非极性溶剂在pHIO条件下进行选择性抽提，可得到髙纯度的 Phyllodulcin 产品。
质粒pCLRM216、pRMll、pUMll的转化体，在lOmLYPD培养基中培养后, 均能产生莫奈林。凝胶定虽扫描表明，奐奈林在pUMll转化体中的表达世，超 过可溶蛋白的50%。以141基因为探针对转化体进行DNA印迹分析，测定 pCLKM216的整合拷贝数为10?丨丨，PRM丨丨为12~丨8，pUMll为20?22。经 DNA印迹分析，确走pKMH和pUMll中没有细菌序列。
图3 -34所示为在单糖专--性果糖转移酶合成S -6 - a过程中，底物和产物 浓度的变化。从图中可以看出，在反应初始阶段发酵生成S-6-a的起始速率和 时间成线性关系，随后逐渐失去线性关系，这可能是因为葡萄糖对酶的竞争性抑 制作用和底物浓度降低的缘故。在此期间，少数低聚糖副产物也会通过转果糖基 作用而形成。在反应后期，反应速率和S-6-a的降解速度及剩余蔗糖的浓度和 酶的活力有关。反成过程中，S-6-a的最高浓度可达到12%,得率约为58%， 随后S-6-a会慢慢水解，使果糖浓度逐渐上升。由此可见，5-6-3的得率是 处于动态发展中的，其最大得率依赖于果糖转移酶所引起的各种反应。
图1 -3甜味化合物分子构型的变化对甜味的影响 (1) a- D-吡喃葡萄糖（甜> (2) a- D-吡喃半乳糖（较不甜〉 (3) a- D-吡蝻ft露铕（甜） <4>芦-D-吡喃讨錤溏（苦）
